微藻的生长可以用SLogistic曲线进行描述,SLogistic曲线又称S型生长曲线,微生物种群增长、陆生及水生动物种群增长、细胞生长等过程均可用其描述。完整的微生物生长曲线包括渐增期、快增期、缓增期和衰减期4个时期。用OriginPro8.0中的SLogistic1模型对微藻生长数据进行拟合可以得到拟合度较高的生长曲线,该模型引入最大生长速率以及终止生物量,能准确、定量地描述生物生长规律。拟合生长曲线可以呈现出藻种状态,整体把握藻种活力以及再生长情况。
SLogistic1模型拟合生长曲线
以时间(天数)为自变量(X)、生物量(OD560nm)为因变量(Y),在Origin Pro 8.0中对其进行SLogistic1(SLogistic模型同系列的近似模型)的生长曲线拟合,得到高拟合度的生长曲线及相应函数。
对生长曲线函数进行一阶求导并绘图,得到生长速率曲线图,可求出藻种的最大生长速率(0≤X≤13 d)。对生长速率进行二阶求导得到生长速率函数的两个拐点,两拐点对应的时间点将生长曲线的生长过程分为渐增期、快增期和缓增期3个阶段。在对应的保藏时间下,统计组内的渐增期、快增期、缓增期、生物积累量、最大生长速率、最大生长速率发生时间指标,并确定可以进行统计学分析的特征指标,以评价保藏藻种活力。
拟合生长曲线结果
SLogistic模型的选择
SLogistic模型所对应的假设条件是在有限的生物资源条件下单个微生物生长具有相同的增长率,且所需营养相同。把增长率dy/dx与任意时间的种群生物量y(x)联系在一起,典型的SLogistic模型可以表示为:
式中:k为常数;a为环境容纳最大生物容量,本试验以吸光度定义,即该生物生长过程中所能达到的OD560nm峰值。
其模型所包含的内在机制为:(1)随着y逐渐增长到a过程中,未知利用“剩余空间”(y/a)逐渐减少;(2)种群增长率先由小变大,到曲线中点即生长转折点(a/2)最大,然后逐渐减少,当达到最大生物容量时,增长率趋于零。
SLogistic1模型是SLogistic模型的近似模型,其曲线相比于SLogistic曲线具有更加清晰的3个生长阶段,其快增期更加陡峭。考虑到微藻的生长具有更明显的快增期,因此SLogistic1曲线更适合描述微藻的生长规律。SLogistic1模型可以表示为:
其中最大值及发生时间为:
SLogistic1曲线的特点是随X增加,Y值开始增长缓慢,而在以后的某一范围内迅速增长,X达到某限度后,Y增长趋于缓慢,整个曲线略呈陡峭的“S”型,两条渐近线分别为Y=a和Y=0,a值的物理意义是Y所能达到的最大值,k和XC为Slogistic1曲线方程的特征参数。采用SLogistic1模型进行保藏藻种再生长曲线的拟合,分析可得生长曲线所包含的渐增期、快增期、缓增期以及生长转折点。
以保藏藻株F-1070(编号1-2-2)保藏两个月时为例,活化再生长后的再生长拟合曲线及生长速率曲线见图1。
图1正交试验藻种的再生长拟合曲线及生长速率曲线
由图1可知,保藏藻株F-1070(编号1-2-2)保藏两个月时活化再生长后的SLogistic1拟合生长曲线拟合度较好,其中虚线曲线为拟合的生长曲线Y(X)(0≤X≤13 d),实线曲线为生长速率曲线R(X)(0≤X≤13d),R(X)峰值为最大生长速率。对R(X)二阶求导得到其两拐点(R1,X1)、(R2,X2),X1、X2将整个生长曲线周期分为渐增期、快增期和缓增期,函数模型拟合的曲线具有Y=a的渐近线,因此曲线不包含生物量下降的衰亡期。
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