芽孢杆菌在动物上应用主要依赖其在肠道或环境中繁殖分泌消化酶、维生素或抗菌物质而达到益生的功能。同一菌株在不同生长环境中繁殖和分泌产物能力有很大差异，不同菌株之间的生长潜力和分泌产物类别同样有较大差异。本文主要探究枯草与解淀粉芽孢杆菌的生理生化指标差异，及枯草、地衣与解淀粉芽孢杆菌低温生长和平板上的产酶比较，以期探寻三类芽孢之间性能差异的规律，为其在动物养殖中的应用方案提供菌株性能基础数据指导。
生长曲线制作
从-80℃冰箱取出保种甘油管，用接种环挑取一环菌液，采用划线法接种到营养琼脂平板上，37℃培养至出现单菌落。从平板上挑取一环菌苔，接种到盛有100 mL LB液体培养基中，37℃、200 r/min振荡培养12 h，作为种子。
将种子液按3%接种量接种到盛有100 mL LB液体培养基中，15℃或28℃、200 r/min连续培养24～80 h，每隔4～8 h在超净工作台进行取样，采用分光光度计测定600 nm处吸光值，如菌液过浓，用纯净水进行适当稀释，吸光值控制在0.3～0.6，用相应稀释倍数的LB培养基作为对照。以培养时间t为横坐标，吸光值OD600为纵坐标，制作生长曲线图。
酪素培养基：干酪素10 g，酵母膏1 g，琼脂20 g，用1 mol/L NaOH溶液调节pH为7.0，用蒸馏水定容至1 L，121℃灭菌30 min。
淀粉培养基：可溶性淀粉2 g，蛋白胨10 g，牛肉膏5 g，氯化钠5 g，琼脂20 g，用1 mol/L NaOH溶液调节pH为7.2，用蒸馏水定容至1 L，121℃灭菌30 min。
染色液酸性汞试剂：HgCl215 g，浓HCl 20 mL，加蒸馏水至100 mL。
卢哥氏碘液：碘片1 g，碘化钾2 g。先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾中，待碘全溶后，加蒸馏水至300 mL。
生长曲线绘制
15℃生长曲线试验测定了芽孢杆菌在低温（15℃）下生长情况，每隔8 h取样测定吸光值，共培养80 h。试验表明，两株解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌1号在低温条件下生长好于其余两株枯草和地衣芽孢杆菌。随着时间延长，枯草芽孢杆菌1号的生物量最大，在72 h OD600达到8.0，两株解淀粉芽孢杆菌最高OD600也出现在48 h以后，最高值为3.8～4.4。枯草芽孢杆菌2号和3号在15℃下生长情况较差，48 h后才进入对数生长期，而两株地衣芽孢杆菌生物量80 h内一直低于1.0。综上，试验中两株解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌1号相较于其他四株芽孢杆菌更能耐受低温，较适宜在低温水产养殖水体应用（图1和图2）。
图1枯草芽孢杆菌15℃生长曲线
图2地衣和解淀粉芽孢杆菌15℃生长曲线
28℃生长曲线芽孢杆菌在28℃下生长较为迅速，所评估的7株芽孢杆菌都在4 h内进入对数生长期，24 h即可到达稳定期，生长明显快于低温下。但研究表明，枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌28℃下最高OD600值均低于15℃，因此，同一株菌28℃时最高生物量不一定高于15℃。地衣芽孢杆菌在低温下生长最差的状态，在28℃下长势甚至好于解淀粉芽孢杆菌和部分枯草芽孢杆菌（图3和图4）。
图3枯草芽孢杆菌28℃生长曲线
图4地衣和解淀粉芽孢杆菌28℃生长曲线
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