1.2.6噬菌体裂解谱的测定
取100μL噬菌体原液以1∶1分别与被调查的45株鸡大肠埃希氏菌菌悬液吸附反应15 min,双层琼脂法过夜培养，观察结果。
1.2.7噬菌体最佳感染复数
(multiplicity of infection,MOI)的测定将宿主菌培养至OD600≈0.5(对数生长期)，以固定的对数宿主菌液(100μL)，按照感染复数分别为0.000 000 1、0.000 001、0.000 01、0.000 1、0.001、0.01、0.1、1的比例加入相应体积的噬菌体液并混匀，静置吸附15 min，均补加LB液体培养基至2 mL，振荡培养4 h。10 000 r/min离心10 min，取上清，10倍倍比稀释后，与培养至对数期的菌液混合吸附，用双层琼脂法测定上述比例培养液的噬菌体滴度，滴度最高者即为最佳MOI。
1.2.8噬菌体一步生长曲线的测定
将培养至对数期的菌液(100 ml)与噬菌体液按MOI=0.001混匀，并在静置吸附20 min后补加LB至200 mL，此为时间0，37℃、160 r/min，在0 min、5 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min、40 min、50 min、60 min、70 min、80 min、90 min、110 min、130 min、150 min、170 min、190 min、210 min，19个时间点各取2 mL，离心、稀释、吸附，做3次重复试验，每次2个平行，采用双层琼脂法测定噬菌体滴度，并根据滴度绘制噬菌体感染宿主菌的一步生长曲线。
1.2.9噬菌体pH敏感性的测定
取100μL噬菌体液分别接种于900μL不同pH(pH2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0)的LB液中，37℃水浴孵育2 h，稀释、吸附，用双层琼脂法测定噬菌体滴度。观察噬菌体的生长情况，绘制曲线。
1.2.10噬菌体耐热稳定性的测定
分别取300μL效价为5.5×109PFU/mL的噬菌体原液于若干灭菌离心管中，将之分别置于40、50、60、70、80℃条件下处理，在0 min、20 min、40 min、60 min、80 min、100 min、120 min、140 min、160 min、180 min，10个时间点取样并迅速放置于4℃，稀释、吸附、倒板，测定其不同温度下、不同时间点噬菌体的滴度，绘制热稳定性曲线。
2结果
2.1噬菌体的分离与纯化
本试验以45株鸡大肠埃希氏菌与污水水样共培养，采用双层琼脂平板法经5次反复纯化，在平板上生长的噬菌斑形态、大小均单一，得到1株裂解性噬菌体，其噬菌斑形态和大小见图1，噬菌斑呈透亮的圆形，直径0.8 mm～1.1 mm，边缘整齐无晕环，将此噬菌体命名为vB-EcoM-IME540。
图1噬菌体vB-EcoM-IME540的噬菌斑形态
2.2噬菌体的电镜形态
透射电镜观察结果，如图2所示，噬菌体vB-EcoM-IME540的头部呈椭圆形且尾部具有收缩性，头尾被颈圈分开，头大小约106.7 nm×73.3 nm，尾长约140 nm×16.7 nm。根据国际病毒分类委员会(International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)在2011年发布的第9次报告中噬菌体的分类与命名标准，噬菌体vB-EcoM-IME540属有尾噬菌体目(Caudovirales)，肌尾噬菌体科(Myoviridae)。
图2噬菌体vB-EcoM-IME540的透射电镜照片
2.3噬菌体的核酸类型鉴定
噬菌体核酸琼脂凝胶电泳结果，如图3所示，噬菌体vB-EcoM-IME540的核酸只能被DNaseⅠ消化，却不能被RNase A与Mung Bean Nuclease消化，表明该噬菌体核酸为双链DNA(Double-stranded DNA,dsDNA)。
M.DNA标准DL 15 000；1.vB_EcoM-IME540核酸；2.DNaseⅠ；3.RNase A；4.Mung Bean Nuclease
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