1.4指标测定及计算方法


生物量质量浓度:通过已知干质量钝顶螺旋藻液在560 nm下的光密度值,做生物量质量浓度与OD560的相关性曲线,通过每天测定螺旋藻液OD560,计算生物量质量浓度[17]。


pH值:使用Delta 320型数字式酸度计(Mettler-Toledo,德国)测定。


硝态氮质量浓度:采用紫外分光光度法测定。


磷酸盐质量浓度:采用钼锑抗分光光度法测定。

表4不同稀释率下MPBR中每天采收藻液、获得过滤液,藻产品体积和补加去离子水的体积


溶解性无机碳浓度:采用酸碱指示剂滴定法。


稀释率:每天加入至反应器中Zarrouk培养基的体积与反应器中培养基总体积之比即为稀释率(dilution rate,D),计算公式:

式中:D为稀释率(d-1);Vin为PBR中每天加入新鲜Zarrouk培养基的体积(L/d);V为PBR中培养基总体积(7.4 L)。


膜通量:


式中:J为膜通量(L/(m2·min));Q为流量(L/min);A为膜表面积(m2)。


体积浓缩系数:


式中:υ为体积浓缩系数;Fin为加入至过滤槽中藻液体积(L);Fretentate为过滤槽中剩余藻液体积(L)。


2结果与分析


2.1 PBR中钝顶螺旋藻的生长情况


考察钝顶螺旋藻在PBR中的生物量变化,结果见图3(a)。随着培养时间的进行,藻密度逐渐增大,第1~10天螺旋藻生长较快,生物量达到1.837 g/L;培养至第16天,生物量稳定在2.122 g/L左右;从3(b)中可以看出,随着螺旋藻的生长,pH值从初始9.14升高至9.88,在螺旋藻生长的适合范围内。为维持PBR中适宜的藻浓度,保证较高生物量质量浓度下螺旋藻的快速生长,提高生物量产率,同时避免PBR中藻质量浓度太高而产生光遮蔽现象,根据生长曲线知,螺旋藻在第7~10天生长较快,生物量较高,所以选择螺旋藻生物量质量浓度在1.5~1.8 g/L范围内进行后续实验。

图3钝顶螺旋藻在PBR中生物量和pH变化


分析培养始末培养液的营养盐浓度,结果见表5。经过16 d的培养,HCO3-和NO3--N浓度明显减小,分别减少了83.13 mmol/L和124.34 mg/L,表明藻类利用HCO3-和NO3--N作为生长的碳源和氮源;CO32-浓度从初始30.60 mmol/L升高至77.75 mmol/L;培养过程中HCO3-浓度减少,CO32-浓度升高的原因是在水溶液中无机碳以CO2、HCO3-、CO32-这3种碳源形式存在,三者存在相互转化的动态平衡:

Zarrouk培养基中采用碳酸氢钠作为无机碳源,主要以HCO3-形式存在,此时微藻同化来自HCO3-中的CO2,当CO2被利用后,再不断从HCO3-中重新释出CO2,使得上述平衡向左移动。PO43--P浓度变化不大,分析磷源利用较少的原因可能是需要磷元素参与合成的核酸,ATP等含磷化合物在藻细胞中的含量较低。同时发现培养结束时培养液中仍有一定浓度的HCO3-,NO3--N以及PO43--P剩余,表明初始添加量完全可以满足藻体的生长需要,因此基于成本考虑,可适当减少Zarrouk培养基中营养盐浓度。


2.2 PBR中不同稀释率和生物量质量浓度对钝顶螺旋藻生长和采收的影响


当PBR中螺旋藻生物量质量浓度达到1.540 g/L时,进行不同稀释率对螺旋藻生长和采收的影响实验,结果见图4。当D=0.05 d-1和D=0.08 d-1时,PBR中螺旋藻生物量能够保持稳定,即采收一定藻液后,一天时间内PBR中螺旋藻生物量质量浓度能够恢复到初始值1.540 g/L左右;当稀释率增大到0.10 d-1时,PBR中生物量质量浓度开始出现下降;当D=0.13 d-1时,藻产品生物量质量浓度明显下降,至1.270 g/L,PBR中出现明显的冲刷现象,表明在一定时间内,采收的生物量大于反应器中微藻的增殖量,导致反应器中生物量质量浓度不断降低,无法稳定运行。据此得到螺旋藻初始生物量质量浓度为1.540 g/L,最佳稀释率为0.08 d-1。

表5培养初始和结束时营养盐浓度变化


为进一步增加螺旋藻的生物量产率,考察PBR中螺旋藻生物量质量浓度为1.802 g/L时稀释率为D=0.05、0.08、0.10、0.13 d-1时的螺旋藻的生长情况,结果见图4。当D=0.05 d-1和D=0.08 d-1时,PBR中螺旋藻的生物量质量浓度能够稳定在1.8 g/L左右,表明此时较高的藻质量浓度下,并未产生明显的光遮蔽而影响螺旋藻生长速率;当D增大到0.10 d-1和0.13 d-1时,PBR中生物量质量浓度逐渐下降,出现冲刷现象,导致反应器中生物量质量浓度不断降低。因此,螺旋藻初始生物量质量浓度为1.802 g/L时,PBR的最佳稀释率为0.08 d-1。为提高螺旋藻的采收量,选择螺旋藻初始生物量质量浓度为1.8 g/L左右进行后续MPBR的相关实验。


2.3 MPBR中培养和预采收钝顶螺旋藻


2.3.1体积浓缩系数的确定

MPBR中利用膜组件对藻液进行过滤,浓缩时,增大藻液的体积浓缩系数可提高藻产品生物量浓度,但体积浓缩系数太高会加重膜污染,因此需选择合适的体积浓缩系数。藻液质量浓度为1.855 g/L时,于过滤槽中进行实验,结果见图5。随着体积浓缩系数的增大,藻液质量浓度变大,膜通量逐渐降低;第30分钟时藻液体积浓缩系数达到2.082,此时膜通量由初始值3.803 L/(m2·min)下降至2.970 L/(m2·min),下降了21.92%。在膜组件使用过程中,为保持较高的膜通量水平,提高膜的使用寿命,防止膜污染加重对膜造成损坏以及增加运行成本,在一定压力下,当膜通量下降20%左右时,需进行膜清洗。因此,利用PVDF膜组件过滤,浓缩生物量质量浓度约为1.8 g/L的藻液时,体积浓缩系数最大为2,可最大程度浓缩藻液。



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