真皮炎（DD）首先由Cheli和Mortellaro（1974）描述，是一种传染性蹄病，可引起疼痛性溃疡，通常在牛蹄冠状动脉带上方的皮肤中。除了引起疼痛的病变和跛行外，DD还具有重大的经济影响，因为患有DD的牛产奶量减少，繁殖性能较差（Argáez-Rodriguez等人，1997年）。据估计，在美国，仅牛奶产量减少的影响每年就达190.2006亿美元（Losinger，2006年）。尽管在许多国家，DD在世界范围内都有很高比例的受影响农场的报道（Holzhauer等人，2008年，Cramer等人，<>年），但其病因尚不清楚。此外，到目前为止，还没有可靠的实验室测试来帮助诊断和临床评估厌氧培养物中分离的微生物的DD。1
几种病因学因素与DD有关。通过分子技术分离的细菌包括左旋预防单胞菌、拟杆菌属、未分型支原体属、粪弯曲杆菌和未鉴定的厌氧、非运动、长革兰阴性杆，尖端和密螺旋体属螺旋体（Döpfer et al.，1997，Berry et al.，2010，Yano et al.，2010，Santos et al.，2012）。已经在显微镜下观察到螺旋体（Read等人，1992），抗密螺旋体抗体可以在血清学上检测到（Demirkan等人，1999），并且已经使用16s核糖体PCR检测和测序密螺旋体DNA（Demirkan等人，1998年，Evans等人，2008年，Evans等人，2009年）。
通过16s核糖体PCR对螺旋体进行语言分型已经确定了四组密螺旋体，对应于中密螺旋体/长春品样密螺旋体、噬菌体样密螺旋体、足密螺旋体属新样和恶密螺旋体/齿状密螺旋体（Stamm等人，2002年，埃文斯等人，2009年，Brandt等人，2011年）。
目前，从DD病变收集的密螺旋体的体外培养物有助于确定影响真皮组织感染的抗菌药敏性和酶活性（Evans等人，2008，Evans等人，2011）。密螺旋体的微观观察表明，在几种密螺旋体的纯培养物中存在两种不同的形态形式（Walker等人，1995年，Choi等人，1997年），其特征为包囊和螺旋形式。作为莱姆病（伯氏疏螺旋体）、钩端螺旋体病（钩端螺旋体）和梅毒（梅毒螺旋体）的致病微生物的螺旋体微生物也被记录为通过这些形态变化（Warthin和Olsen，1931年，Czekalowki和Eaves，1954年，Brorson和Brorson，1998年，Burgdorfer，1999年）。与DD有关的密螺旋体形态之间的转变是一个知之甚少的过程，其对DD的病因、持久性和临床病程的可能影响尚不清楚。
试图更好地了解密螺旋体属在DD病因学中的作用将受益于对密螺旋体不同形态形式之间转变的更好了解。在监测从螺旋到包埋形式的转变的同时建立生长曲线对于体外量化密螺旋体及其不同形态至关重要。本研究的目的是以摄影方式跟踪形态变化，并记录通常从牛DD病变中分离出的三种密螺旋体亚型的四种分离株的生长曲线，即齿状密螺旋体样，噬菌体样密螺旋体（两种分离株I和II）和中密螺旋体样。
材料和方法
为本研究制备了四种密螺旋体培养物。密螺旋体样（菌株：1-9185 MED）分离株由加州大学戴维斯分校的D.Read提供。密螺旋体噬菌体样分离物-1由R.Zerner（国家动物疾病中心，NADC）提供。密螺旋体噬菌体样分离物-2（菌株：2-1498）也由加州大学戴维斯分校提供。从威斯康星州的一个奶牛场分离出第四种密螺旋体，并且基于PCR分型（Stamm
结果
齿状锥虫样分离株的平板计数和定量PCR值如图所示。1.平板计数表明，该亚型在孵育1天后达到7.10×12 CFU/mL的峰值。由于生长速度缓慢和培养箱空间限制，仅在第12天后每隔一天收集一次平板计数。定量PCR表明培养物在第1天达到6.10×9 CFU/mL的峰值。血细胞计数器计数用于螺旋状齿状锥虫样分离物，囊肿形式可以是811
讨论
本研究中研究的密螺旋体亚型（T.denticola样，T.phagedenis样和T.medium样）与传染性牛DD密切相关（Walker等人，1995年，Stamm等人，2002年，Evans等人，2008年）。已经观察到这些微生物经历了从螺旋形式到包囊形式的形态变化（Walker等人，1995年，Choi等人，1997年）。以前的研究没有确定这些螺旋体经历的形态变化的任何时间表。
结论
这项研究表明，与DD病因有关的三种密螺旋体亚型在体外生长过程中经历了形态形式的变化。观察到螺旋形式在密螺旋体培养物的原木生长后凝结成囊状形式。这些包囊形式在DD临床表现中的重要性，特别是其复发和持续存在，需要进一步阐明。特别是细菌形态与治疗之间的关联，以及它们之间的关系。
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