2结果与讨论
2.1不同来源乳铁蛋白样品的蛋白质含量
为防止不必问题，各公司样品随机编号为样品1、样品2、样品3，测定各乳铁蛋白样品蛋白质含量的结果，见表1。
表1不同乳铁蛋白样品的蛋白质含量
2.2大肠杆菌菌密度-吸光值的标准曲线
按照1.2.2的方法，以大肠杆菌菌液吸光值（OD625）为横坐标，以菌落总数（cfu/mL）为纵坐标，绘制出吸光值-大肠杆菌菌密度的标准曲线，见图1。
图1大肠杆菌菌密度-吸光值的标准曲线
由图1可得曲线方程式是：y=7.37x+0.2676（R2=0.9987）。
2.3不同浓度的乳铁蛋白对大肠杆菌的抑制作用
2.3.1不同的乳铁蛋白样品对大肠杆菌生长的抑制或促进作用
选择不同浓度的乳铁蛋白分别添加到大肠杆菌的培养基中，考察不同浓度的乳铁蛋白对大肠杆菌生长的抑制或促进作用，结果见图2。
图2不同的乳铁蛋白样品对大肠杆菌生长的抑制作用
由图2可见，在相同的浓度下，不同乳铁蛋白样品对培养中的大肠杆菌作用略有差异。有人认为乳铁蛋白的抗菌活性源于乳铁蛋白螯合游离铁离子的特性，使得微生物失去生长所需的铁元素而被抑制；还有人指出乳铁蛋白是通过氨基末端强阳离子结合区域作用于细菌细胞膜，增加其通透性而达到杀菌的作用。本实验中不同样品间抑菌活性的差异，可能与各样品的铁饱和程度不同有关。
2.3.2不同浓度的乳铁蛋白对大肠杆菌生长的抑制作用
不同浓度的乳铁蛋白对大肠杆菌生长抑制作用的结果，见图3。
图3样品1对大肠杆菌生长的抑制作用
培养0～7 h时，在对照组、2 mg/mL组、4 mg/mL组中大肠杆菌的菌密度迅速上升，最先达到稳定期；在浓度为6、8、10 mg/mL的3个组的菌数则无明显变化；在7 h～22 h内，浓度为6、8、10 mg/mL 3个组的菌密度急速上升至稳定期，并且蛋白浓度越大，上升的速率越快。培养结束时，所有实验组的大肠杆菌菌液密度均大于对照组，并且添加的乳铁蛋白浓度越大，最终的菌液浊度增幅度越大，与对照组差异显著，结果见表2。
表2不同培养时间下样品1对大肠杆菌生长影响的显著性分析
高浓度的乳铁蛋白在培养初期能显著抑制大肠杆的生长，不论其抑菌机理如何，乳铁蛋白的抑菌作用存在量效关系，由于E.coli处于对数增长，未被抑制的E.coli最终将呈现自身快速增长的特性。添加乳铁蛋白的试验组，最终菌数高于空白组，说明乳铁蛋白提供了促进E.coli生长的营养要素。乳铁蛋白的本质是蛋白质，可为微生物的生长提供C源和N源，可作为微生物生长的培养基。多数细菌，包括E.coli不能利用大分子蛋白质，说明大分子蛋白质乳铁蛋白促进E.coli生长的前提是分子的降解。在试验条件下，导致乳铁蛋白降解的因素很可能是来自菌体裂解后释放的酶类，而这种菌体的裂解是否由于菌体的自溶作用则需要进一步的实验验证。乳铁蛋白分子被E.coli利用时已经降解，降解的产物和降解的方式的深入研究，将有助于更深刻理解抗菌蛋白的作用。
2.4大肠杆菌污染程度对乳铁蛋白抑菌性影响
随着初始菌数的增加，乳铁蛋白对大肠杆菌的最长抑菌时间缩短，见图4。
可见，食品原料的初始污染程度显著影响抗菌蛋白的抑菌效果；由于乳铁蛋白在培养后期能促进细菌生长，在食品的保藏中可能导致更严重的食品安全问题。这应是食源性抗菌蛋白类防腐剂开发利用时，需要考虑的问题。如何与其他防腐剂复合处理改善抑菌效果将是很有益的研究。
图4大肠杆菌污染程度对乳铁蛋白抑菌性影响
3结论
乳铁蛋白在较低浓度（≤4 mg/mL）下，能促进E.coli生长，在较高浓度（≥6 mg/mL）时能表现出良好的抑菌作用；随着培养时间的延长，不同浓度的乳铁蛋白最终都能促进E.coli生长，同时，菌数的增幅高于空白组。
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