2结果与分析
2.1 ML对3D4/21细胞活性的影响
由表5可知，与control组相比，10μmol/L的ML组细胞存活率最高（P<0.05）；而50μmol/L的ML组细胞存活率显著降低（P<0.05）。
表5不同水平ML对3D4/21细胞活性的影响
注：同列数据肩标含有不同小写字母表示差异显著（P<0.05），含有相同小写字母或无字母表示差异不显著（P>0.05）。
2.2 PEDV在3D4/21细胞中的生长曲线
由图1可知，PEDV-S、M、N基因的mRNA水平随着感染时间的不同有一定的变化。具体表现为，在病毒感染3D4/21细胞的48 h内，病毒基因的相对表达量呈现先增加再降低的趋势，其中病毒感染12 h时，病毒基因的相对表达水平最高。
图1 PEDV适应3D4/21细胞的病毒生成曲线
2.3 ML对PEDV感染3D4/21细胞基因相对表达量的影响
由表6可知，与PEDV组相比，PEDV+ML组全时添加ML使PEDV-S、M、N基因的相对表达量显著下调（P<0.05）。与control组相比，PEDV组全时添加ML处理12 h使IFN-β、IFITM3基因的相对表达量显著上调，IL-6基因的相对表达量显著下调；处理24 h使IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1基因的相对表达量显著上调（P<0.05）。与PEDV组相比，PEDV+ML组全时添加ML处理12 h使IL-8、IFN-β、IFITM3基因的相对表达量显著下调（P<0.05），处理24 h使IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1和IFITM1基因的相对表达量显著下调（P<0.05），KCNJ13基因的相对表达量显著上调（P<0.05）。
表6全时添加ML对PEDV感染3D4/21细胞基因相对表达量的影响（处理方式1）
注：同行数据肩标含有不同小写字母表示差异显著（P<0.05），含有相同小写字母或无字母表示差异不显著（P>0.05）；下表同。
由表7可知，与PEDV组相比，PEDV+ML组在感染后添加ML处理12 h使PEDV-M基因的相对表达量显著上调（P<0.05），处理24 h使PEDV-S、M、N基因的相对表达量显著上调（P<0.05）。与control组相比，PEDV组在感染后添加ML处理12 h使IL-8、IFITM3、MMP13基因的相对表达量显著上调（P<0.05），处理24 h使IL-6、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1、IFITM1、IFITM3基因的相对表达量显著上调（P<0.05）。与PEDV组相比，PEDV+ML组在感染后添加ML处理12 h使MMP13基因的相对表达量显著下调（P<0.05），处理24 h使IL-6、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1、IFITM1、IFITM3基因的相对表达量显著下调（P<0.05），KCNJ13基因的相对表达量显著上调（P<0.05）。
表7感染后添加ML对PEDV感染3D4/21细胞基因相对表达量的影响（处理方式2）
3讨论
3.1 ML对3D4/21细胞活性的影响
ML属于一种中链脂肪酸，能为机体提供能量。有研究表明，ML有助于改善动物生长或生产性能及肠道健康，亦可预防和治疗疾病。ML作为脂肪酸甘油酯，在仔猪肠道未发育完全时能直接结合肠上皮细胞，对仔猪生长产生有益作用；Lee等研究发现，给新生仔猪直接灌服中链脂肪酸酯能够提升存活率。本试验中，细胞培养基液中加入ML可以促进细胞巨噬细胞的增殖，这与上述结果一致，可能是通过给细胞提供能量来促进猪肺泡巨噬细胞的增殖分化。且本试验中，10μmol/L的ML可以显著促进细胞增殖，效果好于其他浓度处理。
3.2 PEDV在3D4/21细胞的生成曲线
PEDV感染的主要症状为腹泻和呕吐，基于此症状，研究人员普遍认为它感染的靶细胞是肠上皮细胞（IPEC）。然而近年来，对于PEDV的研究也有了很多新的发现，通过免疫组化等技术发现，PEDV感染的仔猪肺脏有病毒感染和复制。本试验中，在PEDV感染3D4/21细胞的48 h内，病毒基因的相对表达量呈现先增加再降低的趋势，其中12 h病毒基因相对表达量最高，且PEDV-N基因的相对表达量变化幅度最大，这可能是PEDV-N基因转录水平表达量最高的原因，因此N基因也被应用于感染的早期诊断。总的来说，本试验证明PEDV可以感染3D4/21细胞并能够在该细胞中进行复制。
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（一）
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（二）
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（三）
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（四）