枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）具有调节肠道微生态平衡、提高饲料转化率和提高动物免疫力等功能，是微生物饲料添加剂的常用菌种。但由于对选育、传代和保藏等技术的不重视，导致其性能严重退化，选择抗逆性强和发酵效果佳的菌株用于动物饲料添加具有重要意义。该研究观察了一株枯草芽孢杆菌的形态特征，测定了其生长曲线、抗逆性及所发酵饲料的pH值和几种消化酶的活力变化，以为其推广应用提供依据。结果表明：该株枯草芽孢杆菌具有本种所特有的形态特征；在37℃、180 r/min条件下培养，无生长延滞期，生长对数期为0～6 h，生长稳定期为6～10 h，生长衰亡期为10 h以后；分别在37℃、70℃、80℃、90℃和100℃的水浴中处理10min后，其存活率差异不显著（P＞0.05）；在1%～5%的胆盐中生长存活率均大于100%；在pH值为2的酸性环境中培养60min，存活率高达58.8%（P≤0.05）；发酵饲料的pH值随发酵时间的延长而明显降低，而蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力显著升高（P≤0.05）。表明该株枯草芽孢杆菌的饲料学特性优良，是理想的有益微生物饲料添加剂。
畜牧养殖过程对抗生素的不规范使用，导致了病原微生物耐药性增强、药物残留和食品安全等诸多问题，并最终威胁到人类健康。开发绿色新型饲用添加剂来替代或减少抗生素的使用将有助于我国畜牧业的可持续发展。微生态制剂是较理想的饲用抗生素替代品。其能生成乳酸、短链脂肪酸和抑菌活性物质等有益因子，这不仅有利于胃肠道酸性环境的形成，还能调节动物肠道菌群平衡，促进消化代谢和提高饲料转化率。对猪的饲喂试验结果表明，益生菌能明显提高猪的生长速度，改善饲料的利用率，提高仔猪存活率以及降低腹泻的发病率。
枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）是我国农业部批准的可直接饲喂动物的益生菌菌种之一。近年，人们围绕枯草芽孢杆菌菌株的筛选、发酵技术和添加策略的优化等开展了大量的工作。但由于饲料加工过程中的高温处理（可达90℃以上）和制粒等环节对有益微生物有明显的杀灭作用，动物采食后，益生菌也会被肠道环境中的胃酸、胃液和胆盐等抑制甚至杀灭。故选择抗逆性强、发酵效果好的有益微生物菌株具有重要意义。鉴于此，本研究对一株枯草芽孢杆菌的饲料学特性进行了检测，从而为该菌株的推广应用提供理论依据。
1材料与方法
1.1试验材料与仪器
1.1.1试验菌株
枯草芽孢杆菌LBD-1菌株由广东绿百多生物科技有限公司惠赠。
1.1.2主要试剂
营养琼脂培养基和营养肉汤培养基均购自北京陆桥技术有限公司；Folin Ciocalteu试剂盒为北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；革兰氏染色盒购自广东微生物科技有限公司；人工胃液、胆盐均参照文献制备，所用试剂为国产分析纯。发酵所用饲料为正大102小鸡料。
1.1.3主要仪器
BC/BD-27生化恒温培养箱，SPX-250B-Z超净工作台，SW-CJ-2F震荡培养箱，HHS-11-4可见光分光光度计，Bioscreen全自动生长曲线分析仪，密封型手提式粉碎机。
1.2方法
本研究过程主要参照杨锋等、董尚智等、Alonso等的研究报告及行业标准GB 8275—2009、SB/T 10317—1999和NY/T912—2004的方法进行。
1.2.1枯草芽孢杆菌菌落形态观察和菌体镜检将枯草芽孢杆菌LBD-1菌株进行平板划线后放入37℃生化培养箱中培养24 h和48 h，然后挑取典型菌落菌体进行革兰氏染色及镜检。
1.2.2种子液制备无菌条件下，从菌种保存斜面中挑取1环菌苔，接入营养肉汤培养基中，于37℃生化培养箱中培养24 h，即得到细菌种子培养液。