3讨论
本研究从北极狐的肠道中分离出唾液乳杆菌ZJBF005，并进行一系列益生菌所必需的特性评价试验，目的是提供有关北极狐乳酸菌益生菌潜力的基本信息。大多数益生菌制剂经口服后到达胃肠道，因此菌株对胃肠液和胆盐的耐受性是评判益生菌功能的关键。动物胃黏膜分泌的酸有助于消化，是益生菌到达胃肠道末端的主要问题之一。因此，pH被认为是微生物作为潜在益生菌的重要标准之一。在大多数益生菌耐pH评价研究中，通常将pH设置为2~5，因为当食物被吞下时，胃的pH根据食物成分的不同在3~6变化。许多研究表明，乳酸菌可以在低pH下存活。本试验结果与这些公认的事实一致，唾液乳杆菌ZJBF005能抵抗低pH为3的环境并保持相当数量的活菌。在其他研究中也有类似的结果，认为唾液乳杆菌可以在低pH环境中大量存活。然而，当pH降低时，唾液乳杆菌ZJBF005的活菌数显著降低。这与其他研究相似，有报道称当pH为2时，乳酸菌的存活数量显著减少。乳酸菌在pH低于5的环境下生存时，其机制会发生改变，如细胞膜组成和细胞密度、中和过程、多种代谢途径、质子泵、蛋白质和DNA损伤修复等。
胃蛋白酶和胰蛋白酶的抑菌作用是导致胃肠道内微生物死亡的两大因素。结果表明，唾液乳杆菌ZJBF005能在模拟胃液中存活，但随着时间的增加，存活率显著下降。抗胰蛋白酶的能力是选择益生菌的另一个重要标准。胰蛋白酶参与脂肪、蛋白质和碳水化合物的消化，并通过胰管在小肠中分泌。唾液乳杆菌ZJBF005可以在模拟肠液中存活，具有一定的抗胰蛋白酶的能力。随着培养时间的增加，存活率明显下降，这表明胃蛋白酶和胰蛋白酶的抑菌作用更强。乳酸菌对人工胃液和人工肠液的耐受活性在许多其他研究中也有报道。
同样，对胆盐的耐受性也是益生菌的重要特性之一。大多数细菌对胆盐敏感，在胆盐存在的情况下无法生长，因为胆盐具有强大的抗菌活性，主要是通过触发细胞膜结构和损伤DNA。当细菌接触到胆盐时，它们的细胞内稳态受到干扰，由于细胞膜分解，细菌内容物泄漏而导致细胞死亡。但是乳酸菌能够通过胆汁盐水解酶来应对这种不利的条件，把胆盐解耦成氨基酸和胆固醇。在本研究中，唾液乳杆菌ZJBF005也表现出这种能力，并能抵抗不同浓度的胆盐，在动物胃肠道中具有良好的生存潜力。唾液乳杆菌ZJBF005可在0.2%胆盐浓度下存活，而在0.3%胆盐浓度下细菌的生长明显受到抑制。另一项研究也表明，唾液乳杆菌具有良好的抗胆盐能力。许多其他关于乳酸菌的研究也显示了它们在胆盐中的生存能力。
抑制有害细菌生长是益生菌的一个显著特性。在本研究中，菌株对被测病原体表现出不同程度的抑制作用。唾液乳杆菌ZJBF005上清液对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较为显著，而对大肠杆菌无抑制作用。实验室菌株对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均表现出广泛的拮抗活性，这与其他研究人员的发现一致。这些结果同样表明，益生菌的代谢产物有抑菌作用。乳酸菌可产生多种抗菌分子，如过氧化氢、细菌素、类细菌素化合物、细胞外有机酸等。酸性微环境进一步增强了乳酸菌分泌这些化合物的能力。
本研究中，唾液乳杆菌ZJBF005对万古霉素具有耐药性。万古霉素的耐药性被认为是固有的或自然的耐药菌株，在大多数情况下，它们的先天阻力来自于膜的不透水性。因此，根据以往的研究，万古霉素的耐药性对乳酸菌菌株是不可传播的。对四环素和甲氧苄啶的耐药性与Kim等的发现一致。对磷霉素有内源性耐药性，一些具有内在抗生素耐药性的益生菌株在抗生素治疗后可能有助于恢复肠道菌群。这些有益微生物的抗生素耐药性，无论是内在的还是由于任何突变引起的，并不能说明菌株本身存在安全问题。
4结论
本研究从北极狐肠道中分离出一株产酸能力较强的唾液乳杆菌ZJBF005，在体外环境中表现出良好的益生菌特性和抗菌能力，而且对临床使用的多种抗生素不敏感，对动物无毒副作用。因此，唾液乳杆菌ZJBF005可作为动物益生菌制剂的候选菌株。
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