【摘要】：本研究以4头安装永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊羯羊为瘤胃液供体，采用人工模拟山羊瘤胃发酵装置:研究了蛋氨酸和支链氨基酸对山羊瘤胃微生物生长以及发酵的影响；通过特定AA缺省底物的方法，研究了AA对瘤胃微生物生长的限制性以及发酵的影响；通过对EAA的不同配比模式，研究了AA模式对瘤胃微生物发酵参数以及瘤胃微生物的影响。
研究结果表明:
1.蛋氨酸和支链氨基酸对瘤胃微生物生长及发酵的影响:培养液pH值均在6.16～6.56之间变化，pH均值以蛋氨酸组最高为6.38，缬氨酸组最低为6.31；氨氮浓度变化范围为6.04～10.87mg/100ml，均值以亮氨酸组最高为9.78mg/100ml，缬氨酸组最低为7.33mg/100ml；培养液的TVFA摩尔浓度以亮氨酸组最高为41.52mmol/L，空白组最低为36.01mmol/L，各组分的VFA以及各组分的VFA所占TVFA的百分比存在显著差异(P0.05)。乙丙比略高于3:1，A组显著高于B组(P0.05)，其它各组间差异不显著(P0.05)；原虫蛋白、细菌蛋白以及微生物蛋白皆以C组(Leu)最高；培养液尿素氮随培养时间的变化各组均有所降低，蛋氨酸和支链氨基酸的添加不显著影响培养液中尿素氮的含量(P0.05)，培养时间和蛋氨酸与支链氨基酸的添加对谷草转氨酶的影响不显著(P0.05)，随着培养时间的延长，谷丙转氨酶的活性有所增强，蛋氨酸与支链氨基酸的添加对谷丙转氨酶的影响在培养8h后有所差异；原虫与细菌比值以C组最高为183.79%，B组最低为137.71%，微生物AA-N以C组最高，A组最低，细菌AA-N以D组最高，E组最低，原虫AA-N以E组最高，A组最低；蛋氨酸和支链氨基酸影响瘤胃微生物AA组成:谷氨酸(Glu)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、异亮氨酸(Ile)产生了显著的变化(P0.05)，而其它氨基酸差异不显著(P0.05)。
2.AA对瘤胃微生物生长的限制性和发酵的影响:培养液pH值均在6.01～6.45之间变化，均值以C组(-Lys)最高为6.23；氨氮浓度变化范围为7.98～29.05mg/100ml，均值以A组(全量AA)最高为18.16mg/100ml；培养液的TVFA摩尔浓度以A组(全量AA)最高为73.96mmol/L，D(-BCAA)组最低为70.27mmol/L，各组分的VFA以及各组分的VFA所占TVFA的百分比存在显著差异(P0.05)，乙丙比接近3:1，乙酸和丙酸处于相对平衡的状态，各组间差异不显著(P0.05)；四组特定AA的缺省对瘤胃微生物(细菌和原虫)的限制性作用(相对于全量AA组)排序为(由大到小):BCAA芳香族AA蛋氨酸赖氨酸；P/B比值以B组最高为101.37%，D组最低为88.22%，微生物AA-N、细菌AA-N和原虫AA-N分别以E组、D组和E组最高，均以C组最低；特定AA缺省底物的培养使得瘤胃微生物氨基酸组成中的丝氨酸(Ser)、丙氨酸(Ala)、半胱氨酸(Cys)、亮氨酸(Leu)和赖氨酸(Lys)产生了显著的变化(P0.05)，而其它氨基酸差异不显著(P0.05)；微生物的遗传指纹图谱表明细菌和原虫内部菌群结构因特定AA缺省底物而发生了相应的变化，瘤胃微生物(细菌和原虫)多样性均以A组最高；AA对瘤胃蛋白质降解菌(嗜淀粉瘤胃杆菌(R.amylophilus)、溶纤维丁酸弧菌(B.fibrisolvens)和栖瘤胃普雷沃氏菌(P.ruminicola))的生长限制性作用有所差异。
3.AA模式对瘤胃微生物生长及其发酵特征的影响:培养液pH值均在6.12～6.57之间变化，pH均值C组最低为6.25，A组最高为6.29；培养液NH3-N浓度变化的范围为3.45～30.07mg/100ml，均值以A组最低为12.06mg/100ml，D组最高为12.88mg/100ml；培养液中TVFA以C组最高，其次是D组、B组，A组最低。B、C、D组与A组相比差异显著(P0.05)，而B、C、D组之间差异不显著(P0.05)。从乙酸/丙酸值来看，乙丙比接近3:1，乙酸和丙酸处于相对平衡的状态，各组间差异不显著(P0.05)；不同氨基酸模式对瘤胃微生物的生长是有一定影响的。各组的微生物蛋白产量(由大到小)顺序可列为B组(0.4614 mg/ml)A组(0.4393 mg/ml)C组(0.4331 mg/ml)D组(0.4096 mg/ml)；P/B值以及AA-N各组之间差异显著(P0.05)；不同氨基酸模式底物的培养使得瘤胃微生物氨基酸组成中的组氨酸(His)、脯氨酸(Pro)、亮氨酸(Leu)和苯丙氨酸(Phe)产生了显著的变化(P0.05)，而其它氨基酸差异不显著(P0.05)；微生物的遗传指纹图谱表明细菌和原虫内部菌群结构因培养液中底物氨基酸组成的不同而发生了相应的变化；氨基酸模式可以刺激瘤胃蛋白质降解菌(嗜淀粉瘤胃杆菌(R.amylophilus)、溶纤维丁酸弧菌(B.fibrisolvens)和栖瘤胃普雷沃氏菌(P.ruminicola))的生长而可能产生不同的效果。