松针精油作为天然防腐剂，目前研究主要集中在食品防腐方面，对青贮饲料中微生物抑制效果的研究尚未见报道。因此，本试验旨在研究松针精油对青贮饲料中主要微生物（嗜酸乳杆菌、梭状芽孢杆菌、酵母菌、串珠镰刀菌）的抑制效果，为松针精油在青贮饲料抑菌方面的应用提供一定的理论依据。
菌种：嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilusCICC6075）、酵母菌（Saccharomyces cerevisiaeCICC1810）、梭状芽孢杆菌（Bacillus fusiformisCICC10067）、串珠镰刀菌（Fusarium moniliformeCICC2490）
将供试菌种（嗜酸乳杆菌、梭状芽孢杆菌、酵母菌、串珠镰刀菌）培养至对数生长期，取出部分菌液，分为对照组和松针精油组，对照组将菌液直接用相应的液体培养基稀释到菌体个数为105～106CFU/ml；精油组将菌液加到含精油浓度为最低抑菌浓度的液体培养基中，继续培养。分别在0、4、8、12、16、20、24、28、32、36、48 h取样测活菌数，制作出对照组生长曲线和精油组生长曲线。
图1松针精油对嗜酸乳杆菌生长曲线的影响
由图1可知，对照组嗜酸乳杆菌的生长曲线完全符合“S”型生长曲线，有明显的迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期。在0～4 h处于迟缓期，4 h～16 h进入对数生长期，16～24 h进入稳定期，从24 h之后进入衰亡期，最大活菌数为1.08×109CFU/ml。加入松针精油之后，嗜酸乳杆菌的迟缓期仍为0～4 h，而对数生长期延长至20 h，并且最大活菌数较对照组增加27.36%。可见，松针精油对嗜酸乳杆菌并没有起到抑制效果，反而起到了一定的促进作用，延长了对数生长期，导致菌体数量达到了一个新的峰值，并且延缓了衰亡期的到来。
图2松针精油对酵母菌生长曲线的影响
由图2可知，对照组酵母菌的生长曲线符合微生物正常的生长规律，有明显的迟缓期、对数期、稳定期以及衰亡期。在0 h～8 h处于迟缓期，8 h以后进入对数生长期，24 h以后进入稳定期，32 h以后进入衰亡期，最大活菌数为6.7×108CFU/ml。加入松针精油之后，酵母菌的迟缓期被延长，延长至16 h，16 h以后进入短暂的对数生长期，而且对数生长期的菌体数量没有达到正常的峰值，其最大活菌数较对照组降低56.72%，并经过短暂的稳定期，迅速进入衰亡期。因此，可以看出，松针精油对酵母菌有着较强的抑制作用，破坏了酵母菌的生长规律，迟缓期时间变长，较大幅度地降低了对数生长期菌体的生长峰值。
图3松针精油对串珠镰刀菌生长曲线的影响
由图3可知，对照组串珠镰刀菌在0～16 h处于生长迟缓期，16～36 h处于对数生长期，36～48 h处于稳定期，最大活菌数为2.5×109CFU/ml。在加入松针精油后，串珠镰刀菌生长迟缓期延长到24 h，对数生长期缩短到32 h，并且菌体数量的峰值较对照组菌体降低39.68%。由以上分析可看出，松针精油对串珠镰刀菌的生长有着极为明显的抑制效果，能较长时间的抑制串珠镰刀菌的生长，缩短了对数生长期菌种的生长时间，大幅度降低最大活菌数。
图4松针精油对梭状芽孢杆菌生长曲线的影响
由图4可知，对照组梭状芽孢杆菌的生长曲线符合“S”型生长曲线，在0 h～8 h处于迟缓期，8 h～24 h处于对数生长期，24 h～32 h处于稳定期，32 h～48 h处于衰亡期，最大活菌数为8.8×108CFU/ml。加入松针精油后，迟缓期延长到12 h，对数生长期缩短，最大活菌数较对照组菌体降低61.14%，并且经过短暂的稳定期，迅速进入衰亡期。可见，松针精油对梭状芽孢杆菌有一定的抑制作用。
生长曲线法可通过微生物的生长曲线反映群体的生长规律，揭示药物的抑菌效力，并从中判断药物对微生物产生的效果等各种信息[21]。本试验结果显示，对照组菌体的生长曲线符合“S”型生长曲线，遵循微生物正常的生长规律。而添加松针精油之后，酵母菌、梭状芽孢杆菌以及串珠镰刀菌的生长受到抑制，迟缓期延长，对数生长期缩短，并且最大活菌数较对照组有较大幅度的下降。
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