肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)是本世纪引起医院和社区获得性感染(如肺炎、败血症和肝脓肿)的最常见最棘手的人兽共患病原体之一。近年来，由于长期不合理使用抗菌药物，多重耐药(MDR)肺炎克雷伯菌的致病率逐年上升，严重威胁人和动物的健康。替加环素耐药在肺炎克雷伯菌中越来越多地被观察到并引起高度关注。tmexCD1-toprJ1是近年来从我国的鸡和患者中分离的肺炎克雷伯菌中质粒携带的一种新型的耐药-结瘤-分裂(RND)型外排泵基因簇，可引起包括替加环素在内的多药耐药。
抗生素佐剂策略是通过抑制细菌耐药性或增强抗生素杀伤能力来延长现有抗生素寿命的具有成本效益且有前景的方法。在过去几年中，基于替加环素与其他抗生素的联合疗法已被广泛使用，但治疗效率不令人满意。与抗生素不同，非抗生素辅助策略可以通过增强抗生素的杀伤作用来最大化现有抗生素的抗菌功效，这是对抗抗生素耐药性的有希望的方法。到目前为止，已经报道了一些关于替加环素的非抗生素佐剂的研究。有研究表明，tmexCD1-toprJ1阳性细菌的耐替加环素机制为通过细菌膜上的外排泵将替加环素泵出，从而减少替加环素在细菌体内的积累。因此通过抑制tmexCD1-toprJ1阳性细菌外排泵的功能，为tmexCD1-toprJ1阳性细菌感染防治和发现潜在先导化合物提供了新的途径。
下面介绍骆驼蓬灵在制备tmexCD1‑toprJ1介导的外排泵抑制剂中的应用，并通过生长曲线试验验证骆驼蓬灵能够破坏细菌外排泵的功能，并且在体内模型中体现了良好的抗tmexCD1‑toprJ1阳性肺炎克雷伯菌感染效果。这为肺炎克雷伯菌感染防治提供了新的途径和潜在先导化合物。
生长曲线测定
挑取一个K.pneumoniae T2单菌落，接种到装有3mL LB肉汤的试管中，37℃、180rpm震荡培养过夜。过夜培养物以1:100的比例在装有150mL新鲜MHB肉汤的200mL锥形瓶中扩增，直至OD600nm
达到0.3。将OD600nm
值为0.3的菌液倒入三个经过高压灭菌和干燥的50mL小锥形瓶中，每个小瓶20mL。在小瓶中分别加入0、64μg/mL、128μg/mL的骆驼蓬灵，每隔半小时用分光光度计测量一次OD600nm
值，在37℃下记录6小时的数据，并形成生长曲线。实验一式三份，独立重复。
结论：64μg/mL、128μg/mL的骆驼蓬灵分别处理K.pneumoniae T2后，对细菌的生长几乎没有影响，见图。
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