为什么要用液体培养基扩大？为什么细胞培养基有那么多不同的名字？常见的1640和DMEM有什么不同？培养基应该如何储存？这一期我们讲讲细胞培养所用到的培养基。
培养基按照物理性质不同，可以分为液体培养基（liquid culture medium）、半固体培养基（Semi-solid medium）和固体培养基（solid medium）。液体培养基常用于微生物的扩大培养，半固体培养基常用于观察微生物的运动及菌种保藏，固体培养基则长用于微生物的分离和鉴定。
为什么要用液体培养基扩大
培养微生物液体培养基具有能够进行通气培养、振荡培养的优点，在通气或振荡的条件下，能增加微生物供氧量，并让微生物充分接触营养物质。因此，液体培养基有利于微生物的细胞生长，从而提高微生物的数量。而固体培养基，通常含有阻碍微生物运动的琼脂。在静止条件下，培养过程中琼脂会在微生物菌体周围形成透过养分的屏障，影响微生物的养分吸收，导致微生物生长缓慢。如何配置液体培养基微生物营养类型复杂，不同的微生物有着不同的营养要求。因此，配置液体培养基时，要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质，配制针对性强的培养皿。具体配置原则如下：1)培养基组分应适合微生物的营养特点，如细菌喜荤、霉菌喜素；2)营养无的浓度与比例应恰当；3)物理化学条件适宜，如细菌偏碱、真菌偏酸；4)根据培养目的选择原料及其来源，如生产-天然、分类鉴定-合成培养基。常见液体培养基有哪些1)牛肉膏蛋白胨液体培养基，又称营养肉汤,用于培养细菌。成分：成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、蒸馏水(或去离子水)1000mL，pH7.4士0.2；2)LB液体培养基，用于培养细菌,常在分子生物学中应用。成分：胰蛋白陈10g、酵母膏5g、NaCL 10g、琼脂15~20g、双蒸馏水1000mL，pH7.0；3)豆芽汁液体培养基，用于培养酵母菌和霉菌及霉菌原生质体融合。成分：豆芽汁1000mL、磷酸氢二铵1g、KCL 0.2g、MgSO4.7H2O 0.2g，pH6.2-6.4。
为什么细胞培养基有那么多不同的名字？
培养基有很多不同的名字是因为根据不同细胞的培养和应用场景，培养基可以分为多种类型，最常见的是DMEM、RPMI-1640、MEM等。这些培养基有自己的配方特点和适用范围。例如，DMEM适用于哺乳动物细胞的培养，而RPMI-1640则适用于淋巴细胞的培养。此外，还有一些专门用于特定类型细胞培养的培养基，如神经元培养基、肌肉细胞培养基等。培养基是直接购买还是自己配制比较合适呢？我的建议是：常规的细胞培养直接采购商品化的培养基使用。商品化的培养基通常以即用型的液体形式或粉剂形式提供。这种培养基通常用于常见的细胞培养实验中，只要按照合适比例加入血清，就成为了完全培养基，就可以应用于细胞的日常培养、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡等实验中。刚才提到的DMEM、RPMI-1640、MEM等培养基经常是以这种即用型的液体或粉剂形式提供给实验操作者的。此外，除了这些特定配方的即用型培养基意外，还有定制型的培养基，它是指需要根据特定的配方和比例来自行配制的培养基。这种培养基通常用于一些特殊的细胞培养实验中，如原代细胞培养、干细胞培养等。需要配制的培养基通常包括无血清培养基、低血清培养基、添加了特殊因子的培养基等。这些就需要根据各自的特殊项目而制定针对性的培养条件了。
常见的1640和DMEM有什么不同？
下面我们以实验室最常见的DMEM和RPMI-1640为例，来介绍它们之间的不同之处。DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)是一种最广泛应用的细胞培养基之一，它是由Eagle于1959年开发出来的，后由Dulbecco进行了改良。DMEM主要适用于肝脏、肾脏、肺、心脏等多种类型的哺乳动物细胞系的培养。DMEM中含有较高浓度的葡萄糖（4500mg/L）、氨基酸、维生素和微量元素等营养物质。此外，DMEM还添加了丙酮酸和乳酸等缓冲剂，能够保持细胞在较宽的pH范围内正常生长。RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute medium 1640)是一种由Roswell Park纪念研究所开发的细胞培养基，适用于淋巴细胞、骨髓细胞、白血病细胞等多种类型的哺乳动物细胞系的培养。RPMI-1640中含有较低浓度的葡萄糖（2000mg/L）、氨基酸、维生素和微量元素等营养物质。此外，RPMI-1640还添加了缓冲剂HEPES和碳酸氢盐，能够保持细胞在较窄的pH范围内正常生长。DMEM和RPMI-1640在营养成分和缓冲剂的配比上有所不同，上述提到它们各自适合培养的细胞种类是经过大量实验验证得到的结果，建议同学们遵照执行即可。但这也并不代表用错了培养基细胞就一定会死掉，因为DMEM和1640只是在少数成分上做了针对优化，对于大部分细胞株，即使用错，也只是不那么合适而已。
购买回来的培养基应该如何储存？
培养基是一种含有大量营养物质的复杂溶液，其成分非常容易受到环境的影响而发生变化。因此，在储存和使用培养基时需要注意以下几点：温度：有条件的情况下，培养基应该储存在4℃冰箱中，避免暴露在高温环境中。此外，在使用前需要将培养基恢复到室温。光照：培养基应该避免暴露在阳光下或强烈的荧光灯下，以免造成成分变化。消毒：在使用前需要对培养基进行消毒处理，以避免细菌和病毒污染。储存时间：一般来说，开封后的培养基应该在一个月内使用完毕，以避免成分变化造成影响。
以上，就是本期内容，希望能对你的实验有帮助。
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