摘要：试验旨在研究单月桂酸甘油酯(ML)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染3D4/21巨噬细胞基因表达的影响。通过ML对3D4/21细胞活力试验和PEDV在3D4/21细胞中的生长曲线确定最适浓度和最佳时间后，将3D4/21细胞随机分为3组(control组、PEDV组、PEDV+ML组)，各组分别以全时添加10µmol/L ML和PEDV感染细胞后添加10µmol/L ML两种方式进行处理，并检测相关基因相对表达量。
结果表明:添加10µmol/L的ML对3D4/21细胞生长具有显著的促进作用(P<0.05)，病毒感染3D4/21细胞的48 h内PEDV-S、M、N基因相对表达量呈现先增加再降低的趋势，12 h时处于最高;与PEDV组相比，PEDV+ML组全时添加ML处理12 h使PEDV-S、M、N、IL-8、IFN-β、IFITM3基因相对表达量显著下调(P<0.05)，处理24 h使PEDV-S、M、N、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1和IFITM1基因相对表达量显著下调(P<0.05)，KCNJ13基因相对表达量显著上调(P<0.05)。与PEDV组相比，PEDV+ML组在感染后添加ML处理12 h使MMP13基因相对表达量显著下调(P<0.05)，PEDV-M基因相对表达量显著上调(P<0.05)，处理24 h使IL-6、IL-8、IFN-β、MX1、ISG15、IFIT1、IFITM1、IFITM3基因相对表达量显著下调(P<0.05)，PEDV-S、M、N、KCNJ13基因相对表达量显著上调(P<0.05)。综上所述，PEDV感染前ML预处理具有一定的抗病毒效果;PEDV感染使细胞处于免疫应激状态，ML有一定的缓解作用。
引言
猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea vi⁃rus，PEDV）是一种冠状病毒，它可感染各个阶段的猪，尤其对哺乳仔猪的危害最大，死亡率可高达90%，给全球养殖业带来了巨大的损失。在感染初期，被感染猪会出现食欲不振，精神萎靡，呕吐等症状，到了感染后期，被感染猪会出现黄色或深黄色的水样腹泻、脱水，甚至死亡。PEDV主要是通过口和鼻入侵消化系统，可以驻留在肠道随后破坏小肠黏膜的免疫屏障，最终导致仔猪出现一系列症状，甚至死亡。根据Lee等报道的免疫组织化学（IHC）结果，肠绒毛细胞的细胞质和浸入固有层的巨噬细胞中都检测到了PEDV抗原。Park等发现，适应Vero细胞的PEDV在原代猪肺泡巨噬细胞和连续传代的猪肺泡巨噬细胞中都可以复制。这说明PEDV在肺泡巨噬细胞中也可复制滞留，然而肺泡巨噬细胞的低效感染很容易被忽视，这也可能是养猪场存在PEDV持续感染的原因。
单月桂酸甘油酯（glycerol monolaurate，ML）属于一种中链脂肪酸，又名十二酸单甘油酯，能够从母乳、椰子油和美洲蒲葵中提取出来，也可由月桂酸（又称十二烷酸）和甘油酯合成。ML具有亲水基团和易溶于生物膜的疏水基团，能够与生物膜结合，对脂质双层膜产生一系列的影响。研究表明，ML有很强的抗病毒能力，对疱疹病毒等包膜类的病毒有明显抑制效果，这或许与其能和病毒膜产生相互作用有关；Isaacs等发现，在牛奶配方中添加链长为8~12碳的脂肪酸和单甘油酯比长链脂肪酸单甘油酯具有更强的抗病毒和抗菌性；给携带蓝耳病病毒的母猪饲喂含ML的日粮，能够有效改善母猪健康，且未检测到仔猪带毒。同时有研究将中链脂肪酸(包括月桂酸)及其甘油单酯加入乳制品中，发现ML对流感病毒、泡状口腔炎病毒、口腔炎病毒及呼吸系统多核体病毒的增殖具有显著的抑制作用。
试验通过体外细胞培养试验，尝试建立PEDV感染猪肺泡巨噬细胞（3D4/21）模型，首先探究ML对3D4/21细胞活力的影响，在此基础上进一步探究其是否具有抗PEDV感染的作用，并初步探讨抗病毒机制。
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（一）
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（二）
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（三）
十二酸单甘油酯对PEDV感染3D4/21巨噬细胞活性、基因表达的影响（四）