对五味子乙素进行清除自由基及体外抑菌实验。结果表明：五味子乙素对自由基的清除效果明显，其中对羟自由基清除作用大于相同质量浓度的VC，其半数清除质量浓度为0.2mg/mL；对超氧阴离子自由基清除作用小于VC，其半数清除质量浓度为0.24mg/mL。五味子乙素提取液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用，其中对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强，最低抑菌浓度为0.25mg/mL，对根霉、黑曲霉、南洋酵母无明显抑菌活性。
五味子为木兰科植物五味子(Schisandra chinensis(Turcz.)Baill)的果实，习称“北五味子”。《中华人民共和国药典》中规定其果实、种子、藤茎均可入药。其广泛分布于我国东北部山区，它的干燥成熟果实为临床常用的滋补性中药，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效。木脂素类成分是五味子的主要药用成分，主要具有抗肿瘤、抗病毒、保肝、抗衰老等作用。五味子乙素作为五味子木脂素的主要活性成分之一，伴随着人们对木脂素的研究而备受关注。近年来研究表明，五味子乙素具有保肝、抗癌、抗溃疡等药理作用，已经被应用到医药、食品、化妆品等领域中。但国内外目前对于五味子乙素单体的体外抗氧化研究多集中在体内组织抗氧化能力，而对体外抗氧化能力研究的相关报道较少；关于五味子提取物抑菌作用研究，多在五味子总木脂素混合物的抑菌作用研究，其中木脂素单体的抑菌作用和机理研究较少。
本实验采用将超临界萃取五味子粉末，液相色谱制备后的五味子乙素提取液进行清除自由基及抑菌作用的研究，为开发北五味子深加工产品提供依据，也为五味子乙素的研发提供新的可利用资源。
1材料与方法
1.1材料与试剂
五味子，2009年10月采于辽宁省新宾县，由辽宁中医药大学赵百锁副教授鉴定为北五味子。
五味子乙素标准品(纯度≥98%)上海同田生物科技有限公司；磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化钾、硫酸亚铁、邻菲罗琳、抗坏血酸、邻苯三酚、浓硫酸、浓盐酸、双氧水、无水乙醇、甲醇、三羟甲基氨基甲烷均为分析纯沈阳化学试剂厂。
细菌：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、白色念珠菌(Candida albicans)、沙门氏菌(Salmonella)；真菌：南洋酵母(Nanyang yeast)、黑曲霉(Aspergillus niger)、根霉(Rhizopus)。
培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马铃薯蔗糖琼脂培养基。
1.2仪器与设备
UV-1600型紫外-可见分光光度计；电热恒温水浴锅；电子分析天平；Bioscreen全自动微生物生长曲线分析仪；FT-IR200型傅里叶变换红外光谱仪；5890高效液相色谱仪。
1.3方法
1.3.1五味子乙素提取液清除自由基研究
1.3.1.1五味子乙素提取液清除羟自由基的测定
采用超临界CO2提取五味子粉末，在压力30MPa，温度40℃，粒度40目，时间2h条件下，得到五味子乙素的提取率为3.519mg/g，采用制备液相Symmetry C18色谱柱分离，以甲醇-水为流动相，配比70:30洗脱，收集31.2～32.4min五味子乙素提取液。稀释收集五味子乙素提取液，使五味子乙素的质量浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/mL，另配制相同质量浓度梯度的抗坏血酸溶液作比较。
五味子乙素提取液结构鉴定：五味子乙素提取液进行红外光谱和HPLC测定，根据目标成分的峰面积的百分比得出其纯度。
参照Fenton反应体系及林砚淋等的方法进行改进，依次加入反应液。反应体系置于37℃恒温水浴锅中，准确反应90min后，立即取出并迅速测定其在536nm波长处的吸光度(蒸馏水作参比，便于提高精度，测3次，取平均值)。清除率的计算如式(1)所示。
式中：A0为空白组的吸光度；A1为加入0.03%双氧水的吸光度；A样品为加入样品和0.03%双氧水的吸光度。
1.3.1.2五味子乙素提取液清除超氧阴离子自由基的测定
样品制备：稀释分离纯化后的五味子乙素提取液，使五味子乙素的质量浓度分别为：0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/mL，另配制相同质量浓度梯度的抗坏血酸溶液作比较。具体步骤参照邻苯三酚自氧化法，在波长325nm处测定吸光度。
式中：A00为空白组吸光度；A01为加入邻苯三酚溶液的吸光度；A10为加入样品溶液的吸光度；A325为加入样品和邻苯三酚溶液的吸光度。