2.2耐酸能力


由图3可见,在pH值分别为5.0、4.0、3.0、2.0的MRS培养基中,37℃厌氧培养3 h,菌株的存活率分别为98.9%、75.31%、55.25%、22.43%。表明随着MRS液体培养基初始pH值的下降,粪肠球菌菌株SX106的存活率逐渐下降,pH值低于2.0时,生长明显受到抑制。

图3粪肠球菌SX106在不同pH值MRS培养基中的存活率


2.3耐胆盐能力


将菌株SX106分别接种在含0.1%、0.2%、0.3%猪胆盐的MRS培养基中,结果可见:随着胆盐浓度升高,菌株存活率略有下降,但均能保持95%以上的存活率。表明菌株SX106能耐受高浓度胆盐溶液,在其中可以保持良好的生长状态(图4)。

图4粪肠球菌SX106在不同胆盐浓度的MRS培养基中的存活率


2.4药敏性


采用纸片扩散法测定菌株SX106对16种药物的敏感性(表1),结果可见:该菌株对氟苯尼考和多西环素敏感;对环丙沙星、左氧氟沙星、头孢曲松、头孢噻肟、氧氟沙星、阿莫西林和恩诺沙星中度敏感;对青霉素、链霉素、甲氧氨苄嘧啶、氨苄西林、阿奇霉素、卡那霉素和庆大霉素不敏感。

表1粪肠球菌SX106药敏试验结果mm


2.5 DPPH自由基清除能力


通过计算得出,菌株SX106对DPPH自由基的清除率为88.24%。


3讨论


3.1生长特点

微生物生长曲线包括迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期四个时期。粪肠球菌SX106在MRS液体培养基中厌氧培养2 h后即进入对数生长期,菌体生长迅速,菌液浓度迅速升高,12 h后进入稳定期。粪肠球菌能够利用培养基中的营养物质产生乳酸、乙酸等有机酸。在对数期,随着时间延长,乳酸产量逐渐升高,pH值降低,进入稳定期后趋于平稳。


3.2耐酸能力

胃酸是成年动物胃液的主要成分之一,pH值为0.5~1.5。动物摄取食物和饮水后,胃液被稀释,pH值升高;另外,一部分食物具有一定的系酸力,能够中和一部分胃酸,因此胃内容物pH值通常保持在2.0~3.0。高浓度的胃酸具有抑制或杀死胃内细菌的作用。因此,乳酸菌要到达大肠发挥作用,必须通过胃酸的腐蚀,具有较高的存活率。菌株SX106在pH值3.0的MRS液体培养基中培养3 h,其存活率超过50%;pH值2.0时,存活率下降至22.43%。


3.3耐胆盐能力

胆盐能改变细菌细胞膜的通透性,最终造成细菌死亡。因此,能否耐受高浓度胆盐也是衡量益生菌优劣的重要指标。小肠内胆盐的浓度通常在0.03%~0.3%。本试验将菌株SX106接种于含有0.1%、0.2%、0.3%胆盐的MRS液体培养基中,以此衡量该菌株的胆盐耐受能力。结果显示:该菌株在0.3%胆盐中培养3 h仍能保持95%以上的存活率。


3.4药敏性

粪肠球菌作为革兰氏阳性菌的耐药指示菌,其耐药机制复杂,存在对某些抗菌药物的固有耐药性及获得性耐药。益生菌的耐药性是评价其安全性的重要内容。本试验研究了SX106对16种常见药物的敏感性,结果表明其对环丙沙星、左氧氟沙星、头孢曲松、头孢噻肟、氧氟沙星、阿莫西林和恩诺沙星中度敏感;对青霉素、链霉素、甲氧氨苄嘧啶、氨苄西林、阿奇霉素、卡那霉素和庆大霉素不敏感。这与一些研究报道不一致,可能是因为不同来源的粪肠球菌在耐药性方面存在差异。


3.5抗氧化能力

研究表明,乳酸菌能够清除动物肠道内的活性氧分子,具有一定的抗氧化能力。评价其抗氧化能力的重要指标之一是对DPPH自由基的清除率。菌株SX106对DPPH自由基的清除率达到88.43%,表明该菌株具有较强的抗氧化能力,但与部分文献报道不同,原因可能是不同菌株间的差异造成的。


4结论


本研究得出:粪肠球菌SX106能够在低pH环境下(3.0)有50%以上的存活率,在高浓度胆盐环境中存活率达到95%以上;对氟苯尼和多西环素敏感;具有良好的DHHP自由基清除能力。对该菌株的其他益生性能后续将作进一步研究。


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