本研究旨在确定全自动血培养系统的报阳时间(TTP)和生长曲线(GDPG)是否可用于评估菌血症患者的细菌载量及其与疾病严重程度的潜在关联。将已知的细菌菌悬液注入血培养瓶中,从临床分离到的30株金黄色葡萄球菌和30株大肠杆菌用于本实验。下载所有菌株的GDPGs并绘图。通过比较GDPG与“标准”曲线确定细菌载量。在3个细菌载量类别(<100、100~1000、>1000 CFU/mL)中比较与疾病严重程度相关的变量。结果显示,相较于大肠杆菌,金黄色葡萄球菌对血容量更为敏感。若样本被延迟12小时送至微生物实验室会导致TTP降低2~3小时。>1000 CFU/mL的金黄色葡萄球菌和500~1000 CFU/mL的大肠杆菌的TTP平均值分别为15h和10 h。对于金黄色葡萄球菌,细菌载量>100 CFU/mL的患者死亡率较高(死亡OR=9.7,95%CI 1.6~59,p=0.01)。而对于大肠杆菌菌血症,并未发现任何与疾病严重程度相关的变量。总之,全自动血培养系统的GDPG可用于预估细菌载量,且金黄色葡萄球菌的细菌载量与临床预后相关,相反,大肠杆菌的细菌载量与临床预后无关。


前言


血培养仍然是诊断败血症和菌血症的金标准,细菌的种类、敏感性和感染部位对临床治疗至关重要。此外,研究显示细菌载量可能与疾病严重程度及患者预后休戚相关,可通过报阳时间(TTP)来间接估计细菌载量。细菌产生的CO2与血培养瓶中传感器监测到的信号成比例,一旦系统检测到对数生长期就会产生“阳性”信号。同时,自动血培养系统形成的细菌生长曲线图(GDPG)或许可用于评估患者血液中的初始细菌载量。本研究的目的是探索TTP和GDPG是否可用于检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌血症以及细菌载量与疾病严重程度是否存在相关性。


研究内容01


报阳时间与细菌载量细菌载量与报阳时间直接相关。大肠杆菌传代一次的时间为18~24 min,而金黄色葡萄球菌为1~1.2 h。


表1金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的细菌载量与报阳时间的相关性表2不同细菌载量的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的传代时间02

临床血培养的技术特点金黄色葡萄球菌的TTP与血容量显著相关。当细菌载量在50~500 CFU/mL之间时,延迟12 h培养,大肠杆菌的平均TTP缩短3.6±0.5 h,金黄色葡萄球菌的平均TTP缩短2.2±0.7 h。

表3血培养阳性特征


细菌载量与临床预后的相关性金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的平均TTP分别为15 h和10 h,对应的预估细菌载量分别为>1000 CFU/mL和500~1000 CFU/mL。金黄色葡萄球菌菌血症更为严重,患者住院时间长、用药更频繁、疾病严重程度评分更高。图1 30例临床血培养TTP柱状图(A)金黄色葡萄球菌;(B)大肠杆菌

表4菌血症患者临床特征

本文进一步比较了3种细菌载量的临床预后。对于金黄色葡萄球菌菌血症,细菌载量在100~1000 CFU/mL时患者死亡率显著增加。而大肠杆菌无显著变化。

图2金黄色葡萄球菌菌血症患者死亡数、需重症监护、需血管升压药及机械通气的四分位数


总结


本研究表明TTP与初始接种物直接相关,细菌生长曲线受生长速率和初始细菌载量的影响。金黄色葡萄球菌的生长对所获得的血容量敏感,此外,样本转移至微生物实验室延迟12小时便会导致TTP降低2~3h,这些结果表明采集一整套培养瓶的重要性,且要保证采够足量的体积并要迅速转移处理培养瓶。尽管大肠杆菌的生长速率更快,但金黄色葡萄球菌的感染更为严重,患者死亡率更高,可能菌血症的严重程度不仅与细菌载量有关,还与细菌毒素相关,如内毒素、磷壁酸、肽聚糖和细菌DNA等。


总之,从自动血培养系统中下载的GDPG可用于估计菌血症患者的初始细菌载量。金黄色葡萄球菌的细菌载量与较差的临床预后相关。基于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌生长的差异特征,未来会继续深入探索自动血培养系统中的生长曲线,以便根据生长曲线的形状快速识别出细菌种类。


相关新闻推荐

1、鼠伤寒沙门菌株生长曲线、毒力、在肝脾上的定殖能力(三)

2、测定代表性排放路径等级下噬藻体生长曲线、感染力指标——摘要

3、不同锌浓度下菌株Ⅳ8R3、Ⅱ2R3的生长曲线及玉米生长和锌积累的影响(二)

4、泰乐菌素降解菌的生长曲线测定

5、人参外泌体改变巨噬细胞极化状态,抑制非小细胞肺癌细胞的生长的分子机制(二)