以优良的库尔勒香梨为原料，使用YEPD培养基，从中分离获得100株酵母菌，按照菌落特征，形态学分析并结合ITS区基因序列同源性分析确定其种属，确定其为葡萄汁有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）和奥默毕赤酵母（Pichia kudriavzevii），对其进行耐糖分析。
实验步骤
取活化好的菌液按4%接种量接种于葡萄糖含量分别为2%、5%、10%、14%、18%、22%的YPD培养基中，每组2个平行，恒温水浴振荡箱28℃、180 r/min培养，由于菌悬液浓度与OD600nm值成正比，所以利用比浊法，每隔6 h测定一次样品的OD600nm值[15]，获得试验酵母菌的生长曲线。
结果
耐糖生长曲线及耐受性分析
菌株D4和13在不同葡萄糖含量条件下的生长曲线见图1。由图1A可知，随着糖含量增加，菌株D4生长受到不同程度抑制。在糖含量18%条件下，生长量明显下降，延滞期为12 h；在糖含量22%条件下，延滞期为48 h，且未出现明显增长。可得菌株D4的最高耐糖浓度为18%。
由图1B可知，随着糖含量增加，菌株13生长受到不同程度抑制。延滞期为6 h时，生长量明显下降；当糖含量为18%和22%时，菌株13的延滞期延长至48 h未出现明显增长。可得菌株13的最高耐糖浓度为14%。
图1菌株D4（A）和菌株13（B）在不同葡萄糖含量下的生长曲线Fig.3 Growth curves of strain D4(A)and strain 13(B)in different glucose concentration
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