树舌灵芝（Ganoderma applanatum）隶属于担子菌纲（Basitdiomycetes）多孔菌目（Polyporales）多孔菌科（Polyporaceae）灵芝属（Ganoderma），为我国传统的药用真菌。树舌灵芝性平，味苦，具有调节机体免疫力、抗肿瘤、抑菌消炎等多种功效[1－4]。树舌灵芝含有的多糖等多种活性成分能抑制乙肝病毒，调节机体免疫功能，抑制血小板凝集，已开发为治疗乙型肝炎的药物，如“复方树舌片”“肝必复”和“树舌肝泰”等，市场需求量大，应用前景广阔[5－6]。2009年以来，笔者采集野生树舌灵芝种质资源并进行了驯化栽培，目前已取得成功并具有一定的规模，产生了良好的经济效益。
目前国内外树舌灵芝的研究大多集中在提取物的分离及药理活性研究等方面[7－9]，树舌灵芝驯化栽培方面较少，导致生产中缺乏优质高产的菌株，严重影响树舌灵芝野生资源的开发利用。本试验对不同来源的10个野生树舌灵芝分离菌株进行了菌丝生长、液体菌种和出菇筛选试验，以期获得产量高、综合农艺性状优良且性状稳定，适合人工栽培的优良菌株。
1材料与方法
1.1供试菌株
本试验供试菌株均为笔者从泰安及其周边地区收集的野生树舌灵芝子实体上分离纯化后获得，保存于泰安市农业科学研究院食用菌研究所。来源、采集时间及编号见表1。
表1供试菌株来源、采集时间及编号
1.2培养基及栽培基质
PDA固体培养基：具体配方与制备方法参见参考文献[10]。
PDA液体培养基：PDA固体培养基不加琼脂。
母种培养基为PDA加富培养基：马铃薯200 g·L－1（去皮煮汁）、葡萄糖20 g·L－1、蛋白胨3 g·L－1、磷酸二氢钾3 g·L－1、硫酸镁1.5 g·L－1、琼脂20 g·L－1，pH自然。
原种培养基配方：棉籽壳39%、玉米芯20%、阔叶树木屑30%、麦麸8%、生石灰粉1%、硫酸钙1%、蔗糖1%，含水量60%～65%。
栽培种培养基配方：棉籽壳40%、玉米芯20%、阔叶树木屑30%、麦麸8%、生石灰粉1%、硫酸钙1%，含水量60%～65%。
1.3拮抗试验
在无菌条件下将10个供试菌株中的任意2个菌株配对组合，接种于PDA培养基平板上，置于25℃恒温箱中进行对峙培养，观察有无拮抗反应。
1.4菌丝生长试验
1.4.1固体培养
将保存的斜面菌种活化后接种于PDA培养基平板上，25℃黑暗培养7 d，采用“十字交叉法”测量菌落直径，计算菌丝平均生长速率（mm·d－1）。同时观察菌丝长势并比较不同菌株的菌落形态。每个菌株设5个重复。
1.4.2液体培养
取PDA培养基活化培养的菌块（0.5 mm2）接种于PDA液体培养基中，每瓶接种3个菌块，温度28℃，150 r·min－1振荡培养9 d。收集菌丝体，过滤后50℃烘干1 d，称重，计算菌丝体得率。每个菌株设3次重复。
1.5出菇试验
采用熟料栽培，聚丙烯塑料袋规格为18 cm×39 cm×0.004 cm，菇棚内墙式排袋两端割口出芝。发菌期间，观察菌丝长势，用划线法测定菌丝生长速度，调查菌袋污染情况并及时清理。出芝期间观察和记录子实体形态特征，调查出芝期菌袋污染率，统计产量。
1.6优良菌株栽培稳定性试验
选取生物学效率高、综合农艺性状优良的菌株进行栽培稳定性试验。出菇试验同1.5。每次接种50袋，共3次。观察出芝情况，记录产量。
1.7数据处理
干芝生物学效率（P，%）公式为：
式中：m1表示子实体干重（g）；m2表示培养料干重（g）。