2结果与分析
2．1革兰氏阴性菌的抑制结果
抑菌圈大小可反映抑菌保护剂抑菌能力，抑菌圈越大，抑菌能力越强（表1）。当不同浓度桑黄水提物作用下，混有有害微生物的平板出现抑菌圈，且抑菌圈随样品作用浓度的升高，直径也不断扩大；桑黄水提物对志贺氏菌抑制作用较弱，对于大肠杆菌的抑制较为明显，在1 mg/mL作用浓度下，即对大肠杆菌的生长具有抑制作用。由此可得出结论，桑黄水提物能有效抑制革兰氏阴性菌生长，但对不同细菌抑制程度有所不同。
表1不同浓度桑黄水提物对阴性菌的抑制
2．2革兰氏阴性菌的抑制结果
不同浓度桑黄水提物作用下，混有有害微生物金黄色葡萄球菌、李斯特菌、藤黄微球菌以及枯草芽孢杆菌的平板均可以观察到抑菌圈。抑菌作用具有样品浓度依赖性，随样品浓度的升高，抑制作用加强。样品在低浓度范围对藤黄微球菌作用不明显；相对样品对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制作用较为显著。
表2不同浓度桑黄水提物对阳性菌的抑制
2．3霉菌生长抑制情况
将不同浓度桑黄水提物混入PDA固体培养基，将白霉、青霉菌落置于平板中心，对霉菌生长的抑制作用与霉菌生长圈直径大小呈负相关（表3）。样品作用下，霉菌生长圈直径相对于空白对照缩小，且霉菌生长圈直径随着作用剂浓度增大而缩小。10 mg/mL作用浓度下，生长圈直径分别为空白对照直径的16.2%、40.6%，因而样品可有效抑制霉菌的生长。
2．4酵母生长抑制情况
酵母等微生物在培养液中繁殖都能产生浊度。利用Bioscreen全自动生长曲线分析仪测定酵母生长过程中吸光值的改变，反映其生长速度及菌体浓度等。从图1可以看出，在桑黄水提物的作用下，对酵母的生长出现了抑制作用，且随作用浓度的升高，最大吸光值越小，酵母生长周期最高菌体浓度越低。
表3不同浓度桑黄水提物对霉菌生长的抑制作用
2．5巴杀保鲜乳中菌群生长抑制情况
随着桑黄水提物浓度的提高，保存相同时间的保鲜牛奶乳中菌群总数越低，10 mg/mL作用浓度下，10℃保存14 d的巴杀鲜乳菌群总数最高未超过2×104cfu/mL。可见，桑黄水提物能有效控制保鲜牛奶乳中菌群总数，起到延长货架期的作用。
图1不同浓度桑黄水提物对酵母生长的抑制作用
图2不同浓度桑黄水提物对细菌生长的抑制作用
2．6有益菌生长作用情况
选取乳制品中常见有益菌进行试验，保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌并没有产生可见的抑菌圈，只有在浓度较高时才在双歧杆菌平板上观察到较小的抑菌圈（表4），所以本发明的抑菌保护剂对有益菌无显著抑制作用。
表4桑黄水提物对有益菌的作用
3结论与讨论
由于不同乳制品中成分较为复杂，添加菌种类别、奶源成分比例、加工方式、生产设备等均存在差异，因此很难用统一的抑菌方法应用到乳品企业生产中。目前多数乳品企业通过改变生产工艺、提高原奶的品质来达到延长货架期的目的，现有澳大利亚乳企将巴氏杀菌乳从原有21 d保质期，通过生产工艺改造将货架期延长至45 d。另有乳企通过添加天然、安全的抑菌成分的方式，延长保鲜乳制品的货架期，但目前食品标准允许添加的抑菌成分较少，且不具有广谱抑菌性。应当寻求多种保鲜技术的协同作用的方式，以达到抑制乳制品中有害微生物生长的目的。
本试验以食药用真菌桑黄（Phellinus baumii.）子实体为研究对象，使用沸水提取的方法，提取子实体中具有抑菌性的物质。研究分析了该水提物抑菌特性，分别选取了乳制品中具有代表性常见的几类微生物进行抑菌试验。桑黄子实体水提物对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、霉菌以及酵母均有不同程度的抑制作用。对大肠杆菌等革兰氏阴性菌，在1 mg/mL作用浓度时表现出了抑菌性质，但对志贺氏菌作用不明显；对于金黄色葡萄球菌等阳性菌，抑制效果较佳，在较低浓度0.5 mg/mL作用浓度下，即对部分阳性菌表现抑菌活性。酵母、霉菌是乳制品生产、运输、存放方程中，常见微生物污染源，本研究中考察了在桑黄水提物不同作用浓度下，有效抑制了酵母和霉菌的生长，一定程度上延长了保鲜牛乳的货架期。另外，本研究发现，桑黄水提物对牛乳中有益菌的影响除在50 mg/mL高浓度作用下，对双歧杆菌出现轻微抑制现象，但对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌不存在显著抑制作用。因此，1—10 mg/mL桑黄水提物在不抑制有益菌生长的前提下，实现了对牛乳中有害细菌、真菌有效的抑制，能显著控制巴杀牛乳中菌群总数的变化，相对Nisin等抑菌剂具有广谱抑菌性。
不同浓度的桑黄水提物对乳制品中有害指示菌的生长抑制作用（实验仪器与方法）
不同浓度的桑黄水提物对乳制品中有害指示菌的生长抑制作用（实验结果与结论）