2结果与分析
2.1土壤样品测序深度分析
由图1可见,随着测序量的不断增加,曲线逐渐趋向平坦,接近但未达到平台期,说明本试验测序数据量渐进合理,随着测序深度增加只会产生少量新的物种,试验结果能够客观准确地反映当前样本的多样性。
图1葡萄根域土壤样品真菌多样性稀释曲线
2.2添加葡萄枝条对土壤真菌群落结构和组成的影响
处理150 d后不同处理间共有OTU数为464个,各处理特有OTU数分别为T1 301,T2 433,T3 455,T4 106,T5 344。与ck相比,添加葡萄枝条后各处理特有OTU数均有所降低,这意味着添加葡萄枝条能够不同程度降低根区土壤特有真菌物种(图2)。
图2不同枝条添加量土壤真菌OTU分布的韦恩图
对添加不同比例枝条处理后土壤真菌群落组成分析发现,在门水平上,所有土壤样品相对丰度最高的10个门分别为担子菌门(Basidiomycota)、子囊菌门(Ascomycota)、毛霉门(Mucoromycota)、球囊菌门(Glomeromycota)、被孢霉门(Mortierellomycota)、隐真菌门(Rozellomycota)、壶菌门(Chytridiomycota)、Aphelidiomycota、虫霉门(Entomophthoromycota)和捕虫霉门(Zoopagomycota)。担子菌门(Basidiomycota)和子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度最高,属于优势菌群。其中,T2,T4,T5处理提高了60,90,120 d时担子菌门(Basidiomycota)的相对丰度。各枝条添加处理均降低了60,120,150 d时子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度。除T1处理外,其他添加枝条处理均降低了整个处理过程中毛霉门(Mucoromycota)和壶菌门(Chytridiomycota)的相对丰度(图3)。
图3不同枝条添加量下土壤真菌门水平分类学组成和相对丰度
T2,T4,T5处理提高了60,90,120 d时小鬼伞属(Coprinellus)的相对丰度。其中,T2处理还提高了60,90,150 d时小脆柄菇属(Psathyrella)的相对丰度。不同枝条添加量处理主要降低了60,120,150 d时链格孢属(Alternaria)、光黑壳属(Preussia)、枝顶孢属(Acremonium)、丝葚霉属(Papulaspora)、新赤壳属(Neocosmospora)、平脐蠕孢属(Bipolaris)、毛壳属(Chaetomium)、无茎真菌属(Acaulium)、枝孢属(Cladosporium)和间座壳属(Diaporthe)的相对丰度。其中,T2处理降低了整个处理过程中葡萄穗霉属(Stachybotrys)、Acrocalymma、链格孢属(Alternaria)、Albifimbria、枝顶孢属(Acremonium)、丝葚霉属(Papulaspora)、新赤壳属(Neocosmospora)、平脐蠕孢属(Bipolaris)、毛壳属(Chaetomium)、无茎真菌属(Acaulium)、枝孢属(Cladosporium)、Gibellulopsis、曲霉属(Aspergillus)和间座壳属(Diaporthe)的相对丰度(图4)。
图4不同枝条添加量下土壤真菌属水平分类学组成和相对丰度
不同枝条添加量下土壤真菌的主坐标分析(PCoA),见图5。前2个主坐标的贡献率分别为36.62%和15.95%。处理60,90,150 d后,T1处理土壤样品点与ck样品点距离均较近,说明少量添加枝条对土壤真菌群落结构影响较小。其他添加枝条处理均不同程度地改变了土壤真菌群落结构。处理60 d后,T2,T4,T5样品点比较接近,说明此时三者土壤真菌群落结构相似度较高。处理90 d后,T3,T5样品点距离拉近,说明此时二者土壤真菌群落结构趋于相似。处理后期(120~150 d),T5处理样品点远离其他处理,说明T5处理明显改变了土壤真菌群落结构,而此时T3,T4处理土壤真菌群落结构相似度较高。
图5不同枝条添加量下土壤真菌群落主坐标分析