摘要：为评价一株来源于动物肠道的粪肠球菌SX106的益生性能，本试验对其生长曲线，产酸能力，耐酸能力，耐胆盐能力，药敏性以及抗氧化能力等指标进行了分析.试验得出:该菌株37℃厌氧培养2 h开始进入对数生长期，12 h进入稳定期;培养液pH值在第2 h迅速下降，第12 h降至4.15，乳酸产量达到45.56 mmol/L;该菌株在pH 3.0环境下存活率达到50%以上，在0.3%胆盐浓度下存活率达到95%以上;该菌株对氟苯尼考和多西环素敏感，对环丙沙星，左氧氟沙星，头孢曲松，头孢噻肟，氧氟沙星，阿莫西林和恩诺沙星中度敏感，对青霉素，链霉素，甲氧氨苄嘧啶，氨苄西林，阿奇霉素，卡那霉素和庆大霉素不敏感;对DPPH自由基的清除率达到88.24%.综上，粪肠球菌SX106能耐受胃酸环境，且有良好的耐胆盐能力和抗氧化能力.
粪肠球菌是革兰氏阳性菌，能产生乳酸、乙酸等有机酸，抑制动物肠道内有害微生物的生长繁殖，维持动物肠道微生态平衡。《饲料添加剂品种目录（2013）》允许将粪肠球菌添加到动物饲料中。本研究旨在评价猪源粪肠球菌的耐酸能力、耐胆盐能力和抗氧化能力等益生性能，为相关微生物饲料添加剂的开发提供菌株来源。
1材料与方法
1.1材料粪肠球菌菌株SX106由重庆三峡职业学院实验室分离鉴定并保存；MRS培养基购自北京陆桥技术股份有限公司；猪胆盐购自合肥博美生物科技有限责任公司。
1.2方法
1.2.1生长曲线和产酸曲线的测定
取1 mL粪肠球菌SX106菌悬液接种于100 mL MRS液体培养基中，厌氧条件下37℃振荡培养，分别于第0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、24 h取适量培养液在600 nm波长下测定OD值，同时测定培养液的pH值和乳酸含量。以时间为横坐标，以培养液OD值、pH值和乳酸含量为纵坐标，分别绘制曲线。
1.2.2耐酸能力的测定
取1 mL SX106菌悬液分别接种于pH值为2.0、3.0、4.0、5.0的100 mL MRS液体培养基中，厌氧条件下37℃振荡培养3 h后进行活菌计数，并计算存活率。
1.2.3耐胆盐能力的测定
取1 mL SX106菌悬液分别接种于0.1%、0.2%、0.3%100 mL猪胆盐溶液中，厌氧条件下37℃振荡培养3 h后进行活菌计数，并计算存活率。
1.2.4耐药性的测定移取100μL SX106菌悬液滴至MRS固体培养基上，用涂布棒涂布均匀后放置药敏纸片，厌氧条件下37℃培养24 h，观察抑菌圈是否形成，并精确测量抑菌圈直径。
1.2.5 DPPH自由基清除能力的测定
将SX106菌悬液以10 000 r/min离心2 min，取400μL上清液与600μL 0.2 mmol/L DPPH溶液（用无水乙醇配制）混合均匀后，室温下避光反应30 min，然后以10 000 r/min离心2 min，取上清液测定OD517nm值（A1）。取400μL与600μL 80%甲醇溶液作为对照，按照同样步骤测定OD517nm值（A2）；取400μL 80%甲醇溶液与600μL DPPH无水乙醇溶液均匀混合后作为空白对照，测定OD517nm值（A0）。
DPPH自由基清除率计算公式为：
2结果与分析
2.1生长曲线和产酸曲线
菌株SX106在MRS液体培养基中厌氧培养24 h后，其生长曲线和产酸曲线见图1。由图可见，培养2 h后菌体迅速增长，菌液浓度迅速升高，进入对数生长期；8 h后菌体生长速度逐渐缓慢，12 h开始进入稳定期。培养液pH值（初始6.1）在第2 h迅速下降，第12 h降至4.15，第16～24 h pH值维持在4.05～4.07。乳酸产量随着时间延长而，不断增多，在第12 h乳酸产量就达到45.56 mmol/L，至第24 h最高达到53.21 mmol/L（图2）。
图1粪肠球菌SX106的生长曲线和产酸曲线
图2粪肠球菌SX106的产乳酸曲线