本实验旨在研究玉竹多糖-乳酸杆菌体外合生发酵的条件、绘制其生长曲线,进而制备合生元,为玉竹多糖合生元饲料添加剂的开发提供基础。
乳杆菌生长曲线及种子液培养时间的确定
乳杆菌CICC20261的生长曲线可以看出,在0~8 h之间,乳杆菌生长缓慢,8~12 h之间生长迅速,而在12 h后,生长趋于平缓,此时乳杆菌处于生长的稳定期,此时菌液活菌数高,菌液浓度大。因此,12 h可以作为乳杆菌CICC20261种子液的培养时间。
乳杆菌在不同PH中的生长曲线
不同pH值下乳杆菌的生长情况可以看出,培养基的初始pH值对乳杆菌的生长影响较大,在pH 3.5~4.5时,乳杆菌的生长受到抑制。同样,偏碱性的环境对乳杆菌的生长也有抑制,在pH大于7.5时,乳杆菌的生长趋势明显小于在pH4.5~7.0之间。通过比较发现,在pH5.0时乳杆菌的生长趋势最好,因此确定适宜的初始pH值为5.0。
乳杆菌在不同接种量下的生长趋势
不同接种量下乳杆菌的生长曲线可以看出,随着接种量的提高,乳杆菌的在12 h内的OD值是不断增大的。接种量为4%的OD值与接种量为6%的OD值差异并不明显,从节省接种量的方面考虑,确定最适宜的接种量为4%。
乳杆菌在不同温度下的生长曲线
不同培养温度下乳杆菌的生长曲线可以看出,在34℃下乳杆菌的生长趋势最好。因此,选择34℃为乳杆菌的最适宜培养温度。
乳杆菌在不同多糖浓度下的生长曲线
乳杆菌在不同浓度的YZP下的生长曲线可以看出,随着YZP浓度的增加,在培养的前6 h期间,乳杆菌的生长随着多糖浓度的增加而增加。培养6h后,乳杆菌的生长趋于平缓。从节省YZP的用量和缩短培养时间的角度考虑,确定YZP的最佳加入量为6.0 g/L,培养时间为10h。
为了确定乳酸菌-玉竹多糖合生元的最佳发酵工艺,本实验通过考察乳杆菌CICC20261的最适生长条件,确定了乳杆菌的最佳活化培养时间为12 h,初始培养基pH值为5.0,接种量为4%,培养温度为34℃。在此基础上考察了玉竹多糖的最佳加入量和培养时间,玉竹多糖加入量为6 g/L,培养时间为10 h。最终在优选的培养条件下,制备了玉竹多糖合生元。