本文从焦化厂采集活性污泥，进行了含酚废水高效降解菌的分离筛选工作，并对苯酚降解菌株特性进行了研究，为进一步实现含酚废水的生化法无害化处理提供菌种资源。
1材料与方法
1.1活性污泥
活性污泥取自江苏某焦化厂废水处理系统曝气池。
1.2主要培养基
1.2.1苯酚选择培养基
苯酚母液经过滤灭菌后，按需用量加入到灭菌好的无机盐培养基中，配制所需浓度的苯酚选择培养基。加入琼脂即为固体选择培养基。
1.2.2降解培养基
与苯酚选择培养基成分相同，苯酚浓度为500mg/L。
1.3菌株的分离纯化
取样活性污泥1g接种到含苯酚200mg/L的液体选择培养基中，在30℃恒温振荡摇床上120r/min驯化培养5d后，依次转接入含酚500mg/L、1000mg/L、1500mg/L的液体选择培养基中，各驯化培养5d。液体选择培养基驯化结束后，在固体选择培养基平板上进行划线分离，得到单菌落。挑取不同的单菌落，在固体选择培养基中经过多次转接培养，依据其生长情况进行筛选，保留生长速度快，菌落直径大的菌株作为实验菌株。对实验菌株进行反复划线分离，得到纯化菌株。
1.4菌种的复筛
将纯化后的实验菌株接种到液体降解培养基中，在120r/min、30℃下恒温培养，通过定期测定残留苯酚浓度，比较实验菌株的降解性能，选取生长状况好、苯酚降解性能好的菌株作为目的菌株。
2结果与分析
2.1菌种分离结果
本实验采用从焦化厂的曝气池活性污泥中驯化、分离获得的3株优势菌株，分别命名为XL1、XL2、XL3，特征见表1。
2.2菌种复筛结果
对初步筛选出来的3株细菌进行了初步的降解试验研究，其在降解培养基中的生长情况，及苯酚去除情况结果图1，2所示。
图1菌株在降解培养基中的生长情况
图2菌株对培养基中苯酚的去除情况
图1是3株菌在降解培养基中生长过程中菌体数量的变化曲线。从曲线中可以看出菌株XL1生长状况最好，也就是说XL1菌株更适应在含苯酚的环境中生长繁殖。
图2表示的是3株菌对苯酚去除能力。从曲线中可以看出，3个菌株对苯酚均有降解利用的能力，但它们之间存在着一定的差异，经过90h的培养，菌株XL1苯酚去除率为91.7%，相比较而言菌株XL2和XL3对苯酚的降解效果较差。通过复筛，最终选取了在含酚培养基中长势最好、苯酚去除率最高的菌株XL1作为目的菌株，并对其生理生化特性进行进一步研究。
表1菌株特征
2.3菌株XL1生理生化特性
2.3.1菌株XL1的生长曲线
图3是XL1菌在LB培养基中的生长曲线。从曲线中可以明显看出菌株生长的四个阶段[1]，约前4h为延迟期；4～20h为对数生长期；约20h后，菌数增长缓慢，基本维持在一定水平，进入稳定期（静止期）；稳定期持续若干时间以后，菌体数量开始下降，进入衰亡期。
图3菌株XL1的生长曲线
2.3.2菌株XL1最适生长pH
LB培养基调整为不同的初始pH值，菌株XL1在其中培养28h后，分别测定菌体数量。测定结果见图4。
由图4可以看出，菌XL1在pH5～9的范围内均可以生长。pH值为中性微酸时，菌体浓度较高，即菌的生长繁殖清况良好，其中pH值为7.0时，菌体浓度最高，因此，7.0是菌XL1的最适生长pH值。在中性微酸的范围之外，随着pH值的增大或减小，菌体浓度均有所降低，说明碱性或酸性环境对菌的生长是不适宜的。由此得出结论，菌株XL1适宜在中性微酸环境中生长繁殖，并且pH值7.0是最适生长pH值。
图4 pH对菌株XL1生长的影响
2.3.3菌株XL1最适生长温度
不同的培养温度下，菌株XL1在pH为7.0的LB培养基中培养28h后菌体浓度的测定结果见图5。
由图5中可以看出，菌株XL1在培养温度25～30℃范围内均生长良好，其中，30℃时培养液中菌的数量达到最高，说明30℃是菌株XL1的最适生长温度。
2.3.4其他主要生理生化特性
接触酶实验、甲基红实验、菌株需氧性实验等的结果如表2所示。
图5培养温度对菌株XL1生长的影响
表2菌株主要生理生化特性
3结论
本文从焦化厂曝气池活性污泥中筛选得到3株细菌，分别命名为XL1、XL2和XL3。这三个菌株在含有苯酚的培养基中都可以良好生长，且均有一定的苯酚降解能力。其中菌株XL1对苯酚降解能力最强，经过90h的培养，苯酚去除率为91.7%。菌株XL1是一种好氧型的革兰氏阴性杆菌，在LB培养基中，菌株XL1适宜的生长温度范围为25～30℃，适宜初始pH值为中性微酸。
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