细胞工厂多用于大规模的细胞培养实验中,在培养细胞的同时,我们需要监控细胞的生长状况,那么,衡量细胞生长状况的指标有哪些呢?
1.细胞生长曲线:细胞生长曲线是细胞培养实验中最基本的指标,是测定细胞绝对增长数值和生长繁殖基本规律常用的简便方法。常用的方法为:在同一规格的培养瓶中,接种同等量的同一代细胞,经培养后每隔24小时取出几瓶细胞进行计数,以培养时间为横坐标,不同时刻的细胞数的对数为坐标,标出各点并连成线,即为该细胞的生长曲线,反映出细胞生长的动态。
2.细胞生长倍数:是指测定接种时活细胞的浓度,经一个生长周期达到最大活细胞浓度的比率。
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3.细胞分裂指数:是表示细胞增殖旺盛程度的指标。它以被测1000个细胞中的分裂细胞数来计算。其方法为:用秋水仙素将细胞处理1~2小时后,按染色体制片法制片并染色,计算1000个细胞中分裂相的数目,重复4次取平均值,用百分比表示。
4.细胞接种存活率:又称细胞贴壁率。它是细胞被制成分散的悬液后,以低密度(2~5个细胞/cm2)被接种到细胞工厂中,贴壁并能存活生长形成细胞小群(克隆)的细胞百分数值,用以表示细胞的生存能力和细胞群的活力。
5.克隆形成率:克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强;二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强;正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。并且克隆形成率与接种密度有一定关系,做克隆形成率测定时,接种细胞一定要分散成单细胞悬液,直接接种在碟皿中,持续一周,随时检查,到细胞形成克隆时终止培养。
以上是衡量细胞工厂中细胞生长状况的有关指标,通过这些指标可以判断细胞在培养容器中的生长情况,以便及时发现情况,做出调整。
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