马血清一般分为两种:第一种马血清含有的大分子蛋白比较多,适合用于蛋白封闭;第二种马血清为细胞培养级。它经过多次过滤,祛除了许多大分子蛋白,但保留了血清中促细胞生长的活性因子,因而能用于细胞培养,例如神经细胞培养时,培养基中即需要添加马血清。
细胞培养级马血清的应用,具体列举如下:
1.马血清可用于细胞培养和干细胞的诱导分化,例如:
(1)RPMI-1640培养液加马血清培养脐带血单个核细胞
(参考文献:李春莉,王建伟,姜蓉,et al.人参总皂苷诱导红系血细胞增殖的信号转号[J].中国组织工程研究,2009(23):4568-4572.)。
(2)原代培养神经细胞。有人用含10%马血清的DMEM,分离培养BALB/c小鼠原代脑神经细胞。发现和添加2%神经细胞生长剂B27的Neurobasal培养基相比,含10%马血清的DMEM培养基更节省成本,方便廉价。
(参考文献:李丹,吕耀中,王微,等.两种培养基分离培养BALB/c小鼠原代神经细胞方法的比较[C]//中国北方实验动物科技年会.辽宁省实验动物学会,2015.)
(3)诱导脂肪干细胞向成肌细胞分化(文献来源:刘杰,傅强.马血清在脂肪干细胞成肌诱导中的作用[J].中国组织工程研究,15(14))。
(4)培养骨髓基质细胞。与胎牛血清相比,马血清对小鼠骨髓基质细胞的促增殖作用更好(文献来源:王改琴.当归多糖对小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达及其黏附功能的影响[D].学位论文.重庆医科大学,2008.)。
(5)添加20%马血清的L-DMEM培养液可诱导人骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。(文献来源:赵文静,陈亚洁,刘薇.人骨髓间充质干细胞分离培养及生物学特性研究.中国现代医学杂志.2006.16(18):2744-2747)
2.马血清添加到微生物培养基中,可用于培养微生物,如:
(1)马血清添加到培养基中用于支原体的培养。在《兽药典》中,含马血清的支原体培养基被用于兽用疫苗的支原体检查。用KM2培养基(含马血清)还可培养猪肺炎支原体(文献来源:胡茂志焦新安,等.猪肺炎霉形体单克隆抗体的制备与鉴定.《中国兽医科技》2004年12期);
(2)马血清加入到固体和液体培养基中,可用于培养幽门螺杆菌。并且,和羊血清和牛血清比较,添加马血清的培养基更易于分装和保存。(文献来源:刘琳娜,丁士刚,张静,等.几种培养幽门螺杆菌方法的比较[J].胃肠病学,2012,017(004):240-241.);
3.马血清及激素可共同诱导建立家兔股骨头缺血坏死的模型。(文献来源:洪嵩,张天宏.非创伤性股骨头坏死模型的血液流变学及脂质代谢[C]//2009第一届贵州骨科论坛.)